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目的:探讨雄激素依赖性前列腺癌细胞中促红细胞生成素产生肝细胞A型受体(EphA)3表达和雄激素受体(AR)信号通路的关联。方法首先通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹实验(Western blot)分别检测前列腺癌细胞LNCaP和22Rv1中EphA3和AR的mRNA及蛋白水平,然后用双氢睾酮(DHT)刺激48 h,测定细胞EphA3、AR和前列腺特异抗原(PSA)表达水平的变化。同时,将成功构建的荧光素酶报告基因重组质粒EphA3-Luc(-789~+146)与AR表达质粒pcDNA3.1(+)-AR或AR特异性小分子干扰RNA(siAR)共转染22Rv1细胞,分析AR对EphA3转录活动的影响。结果 EphA3在前列腺基质细胞WPMY-1中表达水平极低,但在前列腺癌细胞LNCaP和22Rv1中则明显升高,与AR表达模式相似。10 nmol/L DHT不仅明显上调22Rv1细胞中AR、PSA和EphA3表达水平,也显著升高LNCaP细胞中相关基因和蛋白水平。而且细胞内不同AR表达水平会显著影响EphA3启动子活性。结论 AR通过提高EphA3启动子活性上调EphA3表达水平。

作者:刁小伟;李园;皮玉瑞;李同辉;刘平;卢山

来源:天津医药 2015 年 11期

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作者:
刁小伟;李园;皮玉瑞;李同辉;刘平;卢山
来源:
天津医药 2015 年 11期
标签:
促红细胞生成素产生的肝细胞A型受体3 双氢睾酮 受体,雄激素 前列腺肿瘤 调节 EphA3 dihydrotestosterone receptors,androgen prostatic neoplasms regulation
目的:探讨雄激素依赖性前列腺癌细胞中促红细胞生成素产生肝细胞A型受体(EphA)3表达和雄激素受体(AR)信号通路的关联。方法首先通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹实验(Western blot)分别检测前列腺癌细胞LNCaP和22Rv1中EphA3和AR的mRNA及蛋白水平,然后用双氢睾酮(DHT)刺激48 h,测定细胞EphA3、AR和前列腺特异抗原(PSA)表达水平的变化。同时,将成功构建的荧光素酶报告基因重组质粒EphA3-Luc(-789~+146)与AR表达质粒pcDNA3.1(+)-AR或AR特异性小分子干扰RNA(siAR)共转染22Rv1细胞,分析AR对EphA3转录活动的影响。结果 EphA3在前列腺基质细胞WPMY-1中表达水平极低,但在前列腺癌细胞LNCaP和22Rv1中则明显升高,与AR表达模式相似。10 nmol/L DHT不仅明显上调22Rv1细胞中AR、PSA和EphA3表达水平,也显著升高LNCaP细胞中相关基因和蛋白水平。而且细胞内不同AR表达水平会显著影响EphA3启动子活性。结论 AR通过提高EphA3启动子活性上调EphA3表达水平。