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目的 探讨CTCF过表达对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231中细胞凋亡因子Bax和Bcl-2表达的影响.方法 用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测人乳腺癌细胞系MDA-MB-231中CTCF、Bax和Bcl-2的表达.构建CTCF/pEGFP-N1过表达载体,用慢病毒转染法分别将CTCF/pEGFP-N1和空载质粒转入MDA-MB-231中,记作CTCF组和对照组.经RT-PCR鉴定CTCF成功转染MDA-MB-231后,采用实时定量PCR(Q-PCR)检测CTCF组和对照组MDA-MB-231中Bax和Bcl-2的mRNA表达,Western blot和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Bax和Bcl-2的蛋白表达.结果 MDA-MB-231中不表达CTCF,表达Bax和Bcl-2.Q-PCR结果显示,CTCF组、对照组中Bax的mRNA表达水平分别为4.63±1.08和2.27±0.16,2组间差异有统计学意义(t=27.50,P<0.05);Bcl-2的mRNA表达水平分别为1.39±0.14和3.56±0.97,2组间差异有统计学意义(t=39.00,P<0.05).Western blot结果显示,CTCF组中Bax蛋白表达水平高于对照组,Bcl-2蛋白水平低于对照组.ELISA结果显示,CTCF组和对照组中Bax蛋白表达水平分别为15.25±2.17和6.24±1.78,2组间差异有统计学意义(t=26.84,P<0.05);Bcl-2蛋白表达水平分别为4.59±0.97和10.68±1.93,2组间差异有统计学意义(t=21.72,P<0.05).结论 CTCF过表达可促进乳腺癌细胞中凋亡因子的表达,抑制抗凋

作者:张晓宇;康晓宁;刘伟;刘志明;王鹏;王遵义

来源:天津医药 2017 年 45卷 10期

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作者:
张晓宇;康晓宁;刘伟;刘志明;王鹏;王遵义
来源:
天津医药 2017 年 45卷 10期
标签:
乳腺肿瘤 bcl-2相关X蛋白质 基因,bcl-2 CTCF 凋亡因子 breast neoplasms bcl-2-associated X protein genes,bcl-2 CTCF apoptosis factors
目的 探讨CTCF过表达对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231中细胞凋亡因子Bax和Bcl-2表达的影响.方法 用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测人乳腺癌细胞系MDA-MB-231中CTCF、Bax和Bcl-2的表达.构建CTCF/pEGFP-N1过表达载体,用慢病毒转染法分别将CTCF/pEGFP-N1和空载质粒转入MDA-MB-231中,记作CTCF组和对照组.经RT-PCR鉴定CTCF成功转染MDA-MB-231后,采用实时定量PCR(Q-PCR)检测CTCF组和对照组MDA-MB-231中Bax和Bcl-2的mRNA表达,Western blot和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Bax和Bcl-2的蛋白表达.结果 MDA-MB-231中不表达CTCF,表达Bax和Bcl-2.Q-PCR结果显示,CTCF组、对照组中Bax的mRNA表达水平分别为4.63±1.08和2.27±0.16,2组间差异有统计学意义(t=27.50,P<0.05);Bcl-2的mRNA表达水平分别为1.39±0.14和3.56±0.97,2组间差异有统计学意义(t=39.00,P<0.05).Western blot结果显示,CTCF组中Bax蛋白表达水平高于对照组,Bcl-2蛋白水平低于对照组.ELISA结果显示,CTCF组和对照组中Bax蛋白表达水平分别为15.25±2.17和6.24±1.78,2组间差异有统计学意义(t=26.84,P<0.05);Bcl-2蛋白表达水平分别为4.59±0.97和10.68±1.93,2组间差异有统计学意义(t=21.72,P<0.05).结论 CTCF过表达可促进乳腺癌细胞中凋亡因子的表达,抑制抗凋