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目的 探讨靶向沉默水通道蛋白4(AQP4)基因对非小细胞肺癌细胞化疗敏感性影响,并研究其分子作用机制.方法 实时荧光定量PCR (qRT-PCR)和Western blot分别检测非小细胞肺癌A549细胞以及顺铂耐药菌株A549/DDP中AQP4 mRNA和蛋白的表达.设计靶向AQP4的siRNA-1和siRNA-2,采用siRNA抑制A549/DDP细胞中AQP4的表达,筛选出最优siRNA,将其转染A549/DDP细胞,设立siRNA-NC组和空白对照组.CCK-8法检测细胞增殖能力并计算各组细胞的半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测细胞凋亡.Western blot检测P53和Bcl-2蛋白的表达.结果 AQP4 mRNA和蛋白在A549/DDP细胞中的表达水平显著高于A549细胞,AQP4表达沉默后A549/DDP细胞增殖抑制,细胞凋亡增加,对顺铂的敏感性增加,凋亡相关蛋白P53表达增加,而Bcl-2蛋白表达降低.结论 通过靶向调控AQP4的表达可以增加非小细胞肺癌细胞对化疗药物的敏感性.

作者:郭守俊;谢传华;黄萍;邱伊连;王硕;班振英;张威

来源:天津医药 2019 年 47卷 5期

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作者:
郭守俊;谢传华;黄萍;邱伊连;王硕;班振英;张威
来源:
天津医药 2019 年 47卷 5期
标签:
非小细胞肺癌 靶向调控 耐药性 AQP4 RNA干扰
目的 探讨靶向沉默水通道蛋白4(AQP4)基因对非小细胞肺癌细胞化疗敏感性影响,并研究其分子作用机制.方法 实时荧光定量PCR (qRT-PCR)和Western blot分别检测非小细胞肺癌A549细胞以及顺铂耐药菌株A549/DDP中AQP4 mRNA和蛋白的表达.设计靶向AQP4的siRNA-1和siRNA-2,采用siRNA抑制A549/DDP细胞中AQP4的表达,筛选出最优siRNA,将其转染A549/DDP细胞,设立siRNA-NC组和空白对照组.CCK-8法检测细胞增殖能力并计算各组细胞的半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测细胞凋亡.Western blot检测P53和Bcl-2蛋白的表达.结果 AQP4 mRNA和蛋白在A549/DDP细胞中的表达水平显著高于A549细胞,AQP4表达沉默后A549/DDP细胞增殖抑制,细胞凋亡增加,对顺铂的敏感性增加,凋亡相关蛋白P53表达增加,而Bcl-2蛋白表达降低.结论 通过靶向调控AQP4的表达可以增加非小细胞肺癌细胞对化疗药物的敏感性.