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目的 探讨下调长链非编码RNA(lncRNA)上皮性卵巢癌转录因子2(HOST2)表达对人卵巢癌SKOV3细胞顺铂敏感性的影响及其作用机制.方法 体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,取对数生长期细胞分为空白对照组、阴性对照组和siRNA干扰组,其中阴性对照组和siRNA干扰组SKOV3细胞应用Lipofectamine 2000分别转染阴性对照siRNA和lncRNA HOST2-siRNA,空白对照组未进行转染.采用qPCR法检测各组细胞lncRNA HOST2的表达;Western blot检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)信号通路相关蛋白Akt、p-Akt(S473)、p-Akt(S380)及Bcl-2的表达;CCK-8法检测经不同浓度(0、20、40、60、80、100μmol/L)顺铂作用后细胞的存活情况,并计算半抑制浓度(IC50);流式细胞术检测经20μmol/L顺铂作用后的细胞凋亡率.结果 与空白对照组和阴性对照组比较,siRNA干扰组细胞lncRNA HOST2表达及p-Akt(S473)、p-Akt(S380)和Bcl-2蛋白表达水平均降低(均P<0.05);3组Akt蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05).空白对照组、阴性对照组和siRNA干扰组细胞存活率均随顺铂药物浓度的增加而降低,IC50分别为(59.58±5.97)、(51.42±5.22)和(39.75±5.31)μmol/L.siRNA干扰组细胞凋亡率(12.42%±1.46%)明显高于空白对照组(7.53%±1.25%)和阴性对照

作者:韩建秋;郝丽惠;邢雅玲;张艳;吴维光

来源:天津医药 2020 年 48卷 6期

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作者:
韩建秋;郝丽惠;邢雅玲;张艳;吴维光
来源:
天津医药 2020 年 48卷 6期
标签:
卵巢肿瘤 RNA,长链非编码 上皮性卵巢癌转录因子2 顺铂 PI3K/Akt途径
目的 探讨下调长链非编码RNA(lncRNA)上皮性卵巢癌转录因子2(HOST2)表达对人卵巢癌SKOV3细胞顺铂敏感性的影响及其作用机制.方法 体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,取对数生长期细胞分为空白对照组、阴性对照组和siRNA干扰组,其中阴性对照组和siRNA干扰组SKOV3细胞应用Lipofectamine 2000分别转染阴性对照siRNA和lncRNA HOST2-siRNA,空白对照组未进行转染.采用qPCR法检测各组细胞lncRNA HOST2的表达;Western blot检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)信号通路相关蛋白Akt、p-Akt(S473)、p-Akt(S380)及Bcl-2的表达;CCK-8法检测经不同浓度(0、20、40、60、80、100μmol/L)顺铂作用后细胞的存活情况,并计算半抑制浓度(IC50);流式细胞术检测经20μmol/L顺铂作用后的细胞凋亡率.结果 与空白对照组和阴性对照组比较,siRNA干扰组细胞lncRNA HOST2表达及p-Akt(S473)、p-Akt(S380)和Bcl-2蛋白表达水平均降低(均P<0.05);3组Akt蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05).空白对照组、阴性对照组和siRNA干扰组细胞存活率均随顺铂药物浓度的增加而降低,IC50分别为(59.58±5.97)、(51.42±5.22)和(39.75±5.31)μmol/L.siRNA干扰组细胞凋亡率(12.42%±1.46%)明显高于空白对照组(7.53%±1.25%)和阴性对照