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目的 探讨扶肾方对大鼠腹膜间皮细胞转化生长因子-β受体Ⅰ(TGF-βRⅠ)、TGF-βRⅡ、Smad泛素化相关因子2(Smurf2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)的影响及抑制上皮-间充质转分化(EMT)的作用机制.方法 原代培养大鼠腹膜间皮细胞,传至第2代并鉴定后,分为空白对照(C)组,含药血清(B)组,模型(T)组(40μg/L TGF-β1),模型+含药血清(T+B)组,模型+MG132(T+M)组.培养24 h后收集细胞和培养液上清液,采用蛋白印迹法检测Smurf2蛋白水平,qPCR检测各组TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ、E-cadherin、ZO-1的mRNA转录水平.结果 与C组比较,T组E-cadherin、ZO-1、TGF-β1RⅡmRNA、Smurf2蛋白表达明显上调(P<0.05);与T组比较,B组E-cadherin、ZO-1 mRNA表达均上调,T+B组E-cadherin、ZO-1、TGF-β1RⅡmRNA表达均上调,Smurf2蛋白表达下调,T+M组E-cadherin、ZO-1、TGF-β1RⅠmRNA、Smurf2蛋白表达均下调,TGF-β1RⅡmRNA表达上调(P<0.05);与B组比较,T+B组和T+M组E-cadherin mRNA表达下调,T+M组ZO-1、TGF-β1RⅠmRNA表达下调(P<0.05);与T+B组比较,T+M组E-cadherin、ZO-1、TGF-β1R,TGF-β1RⅡmRNA表达均下调(P<0.05).结论 扶肾方抑制大鼠腹膜间皮细胞EMT可能与上调TGF-βRⅡmRNA转录,下调Smurf2蛋白含量,促进E-cadherin、ZO-

作者:杨波;王孟孟;李洁;乔延恒;杨洪涛

来源:天津医药 2020 年 48卷 6期

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作者:
杨波;王孟孟;李洁;乔延恒;杨洪涛
来源:
天津医药 2020 年 48卷 6期
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上皮-间质转化 受体,转化生长因子β 紧密连接蛋白质类 E-钙黏蛋白 Smad泛素化相关因子2 腹膜间皮细胞 扶肾方
目的 探讨扶肾方对大鼠腹膜间皮细胞转化生长因子-β受体Ⅰ(TGF-βRⅠ)、TGF-βRⅡ、Smad泛素化相关因子2(Smurf2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)的影响及抑制上皮-间充质转分化(EMT)的作用机制.方法 原代培养大鼠腹膜间皮细胞,传至第2代并鉴定后,分为空白对照(C)组,含药血清(B)组,模型(T)组(40μg/L TGF-β1),模型+含药血清(T+B)组,模型+MG132(T+M)组.培养24 h后收集细胞和培养液上清液,采用蛋白印迹法检测Smurf2蛋白水平,qPCR检测各组TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ、E-cadherin、ZO-1的mRNA转录水平.结果 与C组比较,T组E-cadherin、ZO-1、TGF-β1RⅡmRNA、Smurf2蛋白表达明显上调(P<0.05);与T组比较,B组E-cadherin、ZO-1 mRNA表达均上调,T+B组E-cadherin、ZO-1、TGF-β1RⅡmRNA表达均上调,Smurf2蛋白表达下调,T+M组E-cadherin、ZO-1、TGF-β1RⅠmRNA、Smurf2蛋白表达均下调,TGF-β1RⅡmRNA表达上调(P<0.05);与B组比较,T+B组和T+M组E-cadherin mRNA表达下调,T+M组ZO-1、TGF-β1RⅠmRNA表达下调(P<0.05);与T+B组比较,T+M组E-cadherin、ZO-1、TGF-β1R,TGF-β1RⅡmRNA表达均下调(P<0.05).结论 扶肾方抑制大鼠腹膜间皮细胞EMT可能与上调TGF-βRⅡmRNA转录,下调Smurf2蛋白含量,促进E-cadherin、ZO-