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目的 探讨分泌型丛生蛋白(sCLU)对心肌细胞氧化损伤的影响及其机制.方法 采用大鼠心肌细胞H9C2.实验1分为Control组(仅更换培养基)和H2O2组(100μmol/L H2O2处理).实验2分为Control组、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1对照空质粒)、pcDNA3.1-sCLU组(转染pcDNA3.1-sCLU过表达质粒)、H2O2组(100μmol/L H2O2处理)、H2O2+pcDNA3.1组(pcDNA3.1对照空质粒转染48 h后加入100μmol/L H2O2处理)、H2O2+pcDNA3.1-sCLU组(pcDNA3.1-sCLU过表达质粒转染48 h后加入100μmol/L H2O2处理).实验3分为DMSO组(加入1%体积分数的DMSO)、Mdivi-1组(10μmol/L的Mdivi-1处理)、H2O2+DMSO组(加入1%体积分数的DMSO处理30 min后加入100μmol/L的H2O2处理)、H2O2+Mdivi-1组(10μmol/L的Mdivi-1处理30 min后加入100μmol/L的H2O2处理)、H2O2+pcDNA3.1-sCLU组(pcDNA3.1-sCLU过表达质粒转染48 h后加入100μmol/L H2O2处理)、H2O2+pcDNA3.1-sCLU+Mdivi-1组(pcDNA3.1-sCLU过表达质粒转染48 h后加入10μmol/L的Mdivi-1处理30 min,再加入100μmol/L H2O2处理).采用MTT法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)水平.DFCH-DA荧光探针测定细胞活性氧(ROS)水平.实时定量聚合酶链式反应和酶联免疫吸

作者:贺静;孙晓慧;杨莉;乌宇亮

来源:天津医药 2022 年 50卷 2期

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作者:
贺静;孙晓慧;杨莉;乌宇亮
来源:
天津医药 2022 年 50卷 2期
标签:
肌细胞,心脏;氧化性应激;活性氧;丛生蛋白;线粒体自噬
目的 探讨分泌型丛生蛋白(sCLU)对心肌细胞氧化损伤的影响及其机制.方法 采用大鼠心肌细胞H9C2.实验1分为Control组(仅更换培养基)和H2O2组(100μmol/L H2O2处理).实验2分为Control组、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1对照空质粒)、pcDNA3.1-sCLU组(转染pcDNA3.1-sCLU过表达质粒)、H2O2组(100μmol/L H2O2处理)、H2O2+pcDNA3.1组(pcDNA3.1对照空质粒转染48 h后加入100μmol/L H2O2处理)、H2O2+pcDNA3.1-sCLU组(pcDNA3.1-sCLU过表达质粒转染48 h后加入100μmol/L H2O2处理).实验3分为DMSO组(加入1%体积分数的DMSO)、Mdivi-1组(10μmol/L的Mdivi-1处理)、H2O2+DMSO组(加入1%体积分数的DMSO处理30 min后加入100μmol/L的H2O2处理)、H2O2+Mdivi-1组(10μmol/L的Mdivi-1处理30 min后加入100μmol/L的H2O2处理)、H2O2+pcDNA3.1-sCLU组(pcDNA3.1-sCLU过表达质粒转染48 h后加入100μmol/L H2O2处理)、H2O2+pcDNA3.1-sCLU+Mdivi-1组(pcDNA3.1-sCLU过表达质粒转染48 h后加入10μmol/L的Mdivi-1处理30 min,再加入100μmol/L H2O2处理).采用MTT法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)水平.DFCH-DA荧光探针测定细胞活性氧(ROS)水平.实时定量聚合酶链式反应和酶联免疫吸