目的 探讨miR-196b-5p靶向水通道蛋白4(AQP4)促进大鼠脊髓损伤(SCI)后组织修复和神经元轴突再生的机制.方法 双荧光素酶报告检测miR-196b-5p与AQP4靶向关系;实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测SCI后1 d、2 d、3 d、5 d和7 d miR-196b-5p与AQP4变化;RT-qPCR检测假手术(Sham)组、单纯脊髓损伤(SCI)组、agomiR-196b-5p干预(miRNA)组和miR-196b-5p阴性对照(NC)组脊髓miR-196b-5p与AQP4 mRNA相对表达水平,Western blot检测各组脊髓AQP4、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、增殖细胞核抗原(PCNA)和生长相关蛋白43(GAP-43)蛋白相对表达水平,干湿质量法和苏木精-伊红(HE)染色检测脊髓含水量及脊髓空洞大小.结果 双荧光素酶报告显示AQP4是miR-196b-5p的靶基因.与Sham组比较,SCI后各时间点miR-196b-5p表达水平降低(P<0.05),而AQP4 mRNA表达升高并在2 d时达到高峰,随后逐渐降低.与Sham组比较,SCI组、miRNA组及NC组AQP4 mRNA及蛋白,GFAP、PCNA和GAP-43蛋白相对表达水平及脊髓含水量升高,而SCI组及NC组miR-196b-5p相对表达水平降低(均P<0.05).miRNA组AQP4 mRNA,AQP4、GFAP、PCNA蛋白相对表达水平及脊髓含水量较SCI组及NC组降低,脊髓空洞面积减小,而miR-196b-5p和GAP-43相对表达水平升高(均P<0.05).结论 miR-196b-5p通过靶向AQP4

作者：孔俊东；李坚；张强强；李刚；蔡家骏；范仲凯

来源：天津医药 2022 年 50卷 11期