目的:研究过氧化氢(H2 O2)及维生素C对老年豚鼠耳蜗外毛细胞大电导钙激活钾通道(large con‐ductance Ca2+-activated potassium channels ,BKCa channels)电流的影响及其机制。方法采用急性酶分离方法分离25只老年豚鼠耳蜗外毛细胞,以膜片钳全细胞记录方式观察BKCa通道电流(5只豚鼠);记录到稳定、正常的BKCa通道电流后,向新鲜分离贴壁外毛细胞的2 ml浴槽的浴液中加入H2 O2稀释液40μl ,使浴液中H2 O2浓度为4μmol/L ,观察H2 O2对BKCa通道电流的影响(5只豚鼠);再分组加入维生素C溶液10、20、40μl (各组5只豚鼠),使浴液中维生素C终浓度分别为25、50、100μg/ml ,观察 H2 O2和维生素C联合作用对BKCa通道电流的影响。结果①膜片钳全细胞记录模式下,记录到一串幅值较大、快速激活、几乎不失活的电流,激活电压大于-40~-30 mV ,电流随膜电位的增加而增强,并表现出外向整流的特性;加入BKCa通道特异性阻断剂伊比利亚毒素(iberiotoxin ,IbTX)100 nmol/L后,通道活动完全阻断,证实为BKCa通道电流。②加入 H2 O2后,用药3分钟内,当VT为+50 mV时,BKCa通道峰值电流密度最大值从22.09±0.27 pA/pF升至43.53±1.09 pA/pF ,增幅97.06%。H2 O2 4μmol/L+25、50、100
作者:赖丹;黄非;覃纲
来源:听力学及言语疾病杂志 2015 年 2期