背景:组织蛋白酶B(CB)与恶性肿瘤的分期、转移和预后关系密切.目的:建立CB酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,以便评价肿瘤患者血清CB含量与预后的关系.方法:将含有CB cDNA的重组痘苗病毒转染Hela细胞,表达目的蛋白重组CB;经Western blot分析和制备型电泳纯化后,免疫新西兰大白兔,获得CB多克隆抗体.纯化后的抗体一部分作为固化抗体,另一部分用辣根过氧化物酶标记;棋盘滴定法确定工作浓度.结果:痘苗病毒真核表达系统可以高效表达目的蛋白.制备型电泳能简单、有效地纯化蛋白.重组CB免疫动物后,可获得高效价的CB多克隆抗体,用以制备相应的固化抗体和酶标抗体检测CB.结论:用重组CB免疫动物后可获得相应抗体,以建立CB检测的ELISA方法.
作者：蒯小玲；萧树东；刘文忠；任卫平；童菊芳
来源：胃肠病学 2002 年 7卷 6期
