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背景:寡核苷酸芯片是一种检测病原菌的新技术,具有高通量、特异性等特点.目的:采用寡核苷酸芯片技术建立对5种临床常见肠道病原菌(霍乱弧菌、空肠弯曲杆菌、志贺菌、耶尔森菌、单核细胞增生利斯特菌)进行快速、准确鉴定和检测的方法.方法:选取16SrDNA作为检测靶基因,设计通用引物和寡核苷酸探针.病原菌基因组DNA通过16SrDNA通用引物行聚合酶链反应(PCR),扩增后与芯片上的探针杂交.结果:霍乱弧菌、空肠弯曲杆菌、志贺菌、耶尔森菌、单核细胞增生利斯特菌的杂交信号均很强,其他细菌无杂交信号.寡核苷酸芯片的检测时间约5h,其敏感性可达103CFU/ml.寡核苷酸芯片对23例临床腹泻样本的检测结果与传统细菌学培养结果完全一致.结论:寡核苷酸芯片的特异性、稳定性、重复性均较好,是检测临床肠道病原菌准确、可靠、实用性强的方法.

作者:石定;雷家才;尤华强

来源:胃肠病学 2008 年 13卷 7期

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作者:
石定;雷家才;尤华强
来源:
胃肠病学 2008 年 13卷 7期
标签:
弧菌,霍乱 弯曲杆菌,空肠 志贺菌属 耶尔森菌属 利斯特菌,单核细胞增生 寡核苷酸探针
背景:寡核苷酸芯片是一种检测病原菌的新技术,具有高通量、特异性等特点.目的:采用寡核苷酸芯片技术建立对5种临床常见肠道病原菌(霍乱弧菌、空肠弯曲杆菌、志贺菌、耶尔森菌、单核细胞增生利斯特菌)进行快速、准确鉴定和检测的方法.方法:选取16SrDNA作为检测靶基因,设计通用引物和寡核苷酸探针.病原菌基因组DNA通过16SrDNA通用引物行聚合酶链反应(PCR),扩增后与芯片上的探针杂交.结果:霍乱弧菌、空肠弯曲杆菌、志贺菌、耶尔森菌、单核细胞增生利斯特菌的杂交信号均很强,其他细菌无杂交信号.寡核苷酸芯片的检测时间约5h,其敏感性可达103CFU/ml.寡核苷酸芯片对23例临床腹泻样本的检测结果与传统细菌学培养结果完全一致.结论:寡核苷酸芯片的特异性、稳定性、重复性均较好,是检测临床肠道病原菌准确、可靠、实用性强的方法.