前期研究表明胃癌组织中NAD+依赖性15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)表达明显减低,瞬时转染15-PGDH对人胃癌细胞的生长和迁移有一定抑制作用.目的:建立稳定转染15-PGDH基因的人胃癌细胞株SGC7901,观察恢复15-PGDH表达对胃癌细胞生长和迁移的影响,探讨15-PGDH与胃癌发生、发展的关系.方法:以双酶切和质粒测序鉴定真核表达质粒pcDNA3/15-PGDH,采用脂质体法将质粒转染入SGC7901细胞,G418筛选稳定转染株,实时聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法鉴定.分别以甲基噻唑基四唑(MTT)实验和细胞划痕实验检测稳定转染15-PGDH基因的SGC7901细胞株的增殖情况和迁移能力.结果:经4周G418筛选以及实时PCR和蛋白质印迹法鉴定,得到4株可稳定、较高水平表达15-PGDH的SGC7901细胞株.稳定转染15-PGDH基因的SGC7901细胞株,细胞生长和迁移能力显著低于空质粒组(P<0.01).结论:成功建立了稳定转染15-PGDH基因的SGC7901细胞株,恢复15-PGDH表达可显著抑制人胃癌细胞的生长和迁移.15-PGDH表达减低或缺失与胃癌的发生、发展密切相关.
作者:申玉翠;靖大道;叶赛;王弢;张庆华
来源:胃肠病学 2009 年 14卷 5期