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背景:肿瘤坏死因子(TNF)相关凋亡诱导配体(TRAIL)可特异性诱导肿瘤细胞凋亡.X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)是新型抑癌基因,在肿瘤细胞中呈低表达.目的:研究XAF1联合TRAIL诱导人结肠癌细胞株HCT116凋亡的作用.方法:构建重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、对照病毒Ad5/F35-Null,分别以相同感染复数(M01)感染人结肠癌细胞株HCT116,并设立空白对照组,感染4h后加入重组入TRAIL (rhTRAIL).以RTPCR法检测XAF1 mRNA表达;以蛋白质印迹法检测XAF1、PARP、caspase-3、-8、-9蛋白表达;以Annexin V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡率;以MTT法检测细胞增殖抑制率.结果:Ad5/F35-XAF1组和TRAIL+ Ad5/F35-XAF1组XAF1 mRNA和蛋白表达显著高于其余各组.TRAIL+ Ad5/F35-XAF1组PARP、caspase-3、-8、-9蛋白可见明显凋亡裂解带,其余各组未见明显裂解带.Ad5/F35-XAF1组、TRAIL组、TRAIL+ Ad5/F35-Null组、TRAIL+ Ad5/F35-XAF1组细胞凋亡率较空白对照组和Ad5/F35-Null组显著增加(P<0.05),以TRAIL+ Ad5/F35-XAF1组增加最为显著.TRAIL+ AdS/F35-XAF1组HCT116细胞增殖抑制率显著高于TRAIL组和TRAIL+ Ad5/F35-Null组(P<0.05),并呈浓度和时间依赖性.结论:XAF1可增强TRAIL诱导的HCT116细胞凋亡和抑制增殖的作用.

作者:丁燕飞;成小姣;朱黎明;江石湖;叶静;乔敏敏;涂水平

来源:胃肠病学 2013 年 18卷 4期

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丁燕飞;成小姣;朱黎明;江石湖;叶静;乔敏敏;涂水平
来源:
胃肠病学 2013 年 18卷 4期
标签:
X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 结肠肿瘤 细胞凋亡 细胞增殖
背景:肿瘤坏死因子(TNF)相关凋亡诱导配体(TRAIL)可特异性诱导肿瘤细胞凋亡.X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)是新型抑癌基因,在肿瘤细胞中呈低表达.目的:研究XAF1联合TRAIL诱导人结肠癌细胞株HCT116凋亡的作用.方法:构建重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、对照病毒Ad5/F35-Null,分别以相同感染复数(M01)感染人结肠癌细胞株HCT116,并设立空白对照组,感染4h后加入重组入TRAIL (rhTRAIL).以RTPCR法检测XAF1 mRNA表达;以蛋白质印迹法检测XAF1、PARP、caspase-3、-8、-9蛋白表达;以Annexin V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡率;以MTT法检测细胞增殖抑制率.结果:Ad5/F35-XAF1组和TRAIL+ Ad5/F35-XAF1组XAF1 mRNA和蛋白表达显著高于其余各组.TRAIL+ Ad5/F35-XAF1组PARP、caspase-3、-8、-9蛋白可见明显凋亡裂解带,其余各组未见明显裂解带.Ad5/F35-XAF1组、TRAIL组、TRAIL+ Ad5/F35-Null组、TRAIL+ Ad5/F35-XAF1组细胞凋亡率较空白对照组和Ad5/F35-Null组显著增加(P<0.05),以TRAIL+ Ad5/F35-XAF1组增加最为显著.TRAIL+ AdS/F35-XAF1组HCT116细胞增殖抑制率显著高于TRAIL组和TRAIL+ Ad5/F35-Null组(P<0.05),并呈浓度和时间依赖性.结论:XAF1可增强TRAIL诱导的HCT116细胞凋亡和抑制增殖的作用.