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背景:小肠类器官是体外研究肠道上皮最好的工具,应用前景广泛,然而目前国内尚无相关研究报道。目的:在国内建立并优化小肠类器官培养技术,为小肠上皮细胞的基础研究提供平台。方法:常规培养 L-WRN 细胞,收集含不同浓度胎牛血清(FBS)的条件培养基。处死6~8周龄 C57BL/6小鼠,自末端回肠起取约15 cm 肠段,纵向剖开,EDTA 法分离、收集隐窝上皮,以基质胶包埋多聚化后加入不同浓度梯度的 L-WRN 条件培养基,显微镜下动态观察出芽情况,待出芽达一定长度后,重新包埋传代培养。结果:与含20

作者:宋东娟;童锦禄;冉志华;郑青

来源:胃肠病学 2016 年 21卷 2期

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作者:
宋东娟;童锦禄;冉志华;郑青
来源:
胃肠病学 2016 年 21卷 2期
标签:
小肠类器官 原代细胞培养 L-WRN 细胞 培养基,条件性 隐窝 干细胞 Enteroids Primary Cell Culture L-WRN Cells Culture Media,Conditioned Crypts Stem Cells
背景:小肠类器官是体外研究肠道上皮最好的工具,应用前景广泛,然而目前国内尚无相关研究报道。目的:在国内建立并优化小肠类器官培养技术,为小肠上皮细胞的基础研究提供平台。方法:常规培养 L-WRN 细胞,收集含不同浓度胎牛血清(FBS)的条件培养基。处死6~8周龄 C57BL/6小鼠,自末端回肠起取约15 cm 肠段,纵向剖开,EDTA 法分离、收集隐窝上皮,以基质胶包埋多聚化后加入不同浓度梯度的 L-WRN 条件培养基,显微镜下动态观察出芽情况,待出芽达一定长度后,重新包埋传代培养。结果:与含20