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背景:研究发现胶原三螺旋重复蛋白-1(Cthrc1)可能在肝脏疾病尤其是肝纤维化中发挥重要作用,但对肝星状细胞增殖的影响尚未完全阐明。目的:研究 Cthrc1对肝星状细胞增殖的影响。方法:构建 Cthrc1重组腺病毒载体,通过尾静脉注射小鼠体内,以实时 PCR 和蛋白质印迹法分别检测 Cthrc1 mRNA 和蛋白表达。通过胆总管结扎和3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氢-2,4,6-三甲基吡啶(DDC)饲料喂养分别构建小鼠肝纤维化模型,分别尾静脉注射 Ad-Cthrc1或 Ad-GFP,以免疫荧光法检测肝星状细胞数量。结果:成功构建 Cthrc1重组腺病毒载体;实时 PCR 和蛋白质印迹法证实尾静脉注射 Ad-Cthrc1后小鼠肝内 Cthrc1 mRNA 和蛋白表达均较对照组增高。HE 和 Masson 染色示成功建立了小鼠肝纤维化模型。免疫荧光法显示 Cthrc1过表达能明显抑制肝纤维化模型小鼠肝星状细胞的增殖。结论:成功构建了重组腺病毒载体 Ad-Cthrc1并可在体内高效稳定表达,能抑制肝星状细胞的增殖,有望成为肝纤维化的治疗靶点。

作者:钟巍;卞兆连;马雄

来源:胃肠病学 2016 年 21卷 10期

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作者:
钟巍;卞兆连;马雄
来源:
胃肠病学 2016 年 21卷 10期
标签:
胶原三螺旋重复蛋白-1 腺病毒载体 肝星状细胞 细胞增殖 肝硬化 Collagen Triple Helix Repeat Containing Protein-1 Adenovirus Vector Hepatic Stellate Cells Cell Proliferation Liver Cirrhosis
背景:研究发现胶原三螺旋重复蛋白-1(Cthrc1)可能在肝脏疾病尤其是肝纤维化中发挥重要作用,但对肝星状细胞增殖的影响尚未完全阐明。目的:研究 Cthrc1对肝星状细胞增殖的影响。方法:构建 Cthrc1重组腺病毒载体,通过尾静脉注射小鼠体内,以实时 PCR 和蛋白质印迹法分别检测 Cthrc1 mRNA 和蛋白表达。通过胆总管结扎和3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氢-2,4,6-三甲基吡啶(DDC)饲料喂养分别构建小鼠肝纤维化模型,分别尾静脉注射 Ad-Cthrc1或 Ad-GFP,以免疫荧光法检测肝星状细胞数量。结果:成功构建 Cthrc1重组腺病毒载体;实时 PCR 和蛋白质印迹法证实尾静脉注射 Ad-Cthrc1后小鼠肝内 Cthrc1 mRNA 和蛋白表达均较对照组增高。HE 和 Masson 染色示成功建立了小鼠肝纤维化模型。免疫荧光法显示 Cthrc1过表达能明显抑制肝纤维化模型小鼠肝星状细胞的增殖。结论:成功构建了重组腺病毒载体 Ad-Cthrc1并可在体内高效稳定表达,能抑制肝星状细胞的增殖,有望成为肝纤维化的治疗靶点。