目的通过筛选乙型肝炎病毒(HBV)增强子Ⅰ(Enhl)结合蛋白,为HBV复制机制的研究探索新的途径.方法应用噬菌体展示技术,以HBV的增强子Ⅰ的聚合酶链反应(PCR)产物DNA作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行4轮"吸附-洗脱-扩增"筛选过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA序列分析和同源性搜索.结果噬菌体经富集后,从随机筛选的12个克隆中得到6个阳性克隆,成功构建了克隆载体.序列测定后经过同源性搜索,确定了和HBV增强子Ⅰ结合的肝细胞蛋白,共编码3种蛋白.分别为3-磷脂酰肌醇激酶相关蛋白激酶、人类血清白蛋白、核膜孔复合体相互作用蛋白.结论用噬菌体人肝cDNA文库筛选得到了与HBV增强子Ⅰ结合的蛋白,分析了该蛋白的编码基因,可能是作用于增强子Ⅰ的反式作用因子,但它们对HBV增强子Ⅰ是否有转录调控作用还需进行进一步的研究证实.
作者：杨艳杰；成军；陈东风；吴煜；钟彦伟；高学松；刘妍；黄燕萍
来源：胃肠病学和肝病学杂志 2005 年 14卷 1期
