目的 探讨人肝癌细胞遗传印记基因(genetic imprinted gene) PEG10差异性甲基化区(differntially DNA methylated region,DMR)甲基化状态在其印记调控中的作用.方法 以单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)位点为等位基因标记,分析人肝癌HepG2细胞PEG10印记状态;采用RT-PCR、免疫组化及Western-blot检测PEG10表达水平;重亚硫酸盐修饰DNA测序法分析PEG10-DMR甲基化状态;再应用甲基基团供体S-腺苷蛋氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAM)及DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-azaC)在体外及荷瘤裸鼠体内调控HepG2细胞PEG10-DMR甲基化状态,观察PEG10-DMR甲基化状态改变对PEG10印记状态及表达水平的影响.结果 遗传印记基因PEG10在HepG2细胞呈双等位基因表达的印记丢失.与正常肝细胞HL7702相比,其PEG10-DMR甲基化水平显著升高.调控PEG10-DMR甲基化水平可改变PEG10的表达水平,但对其印记状态无影响.结论 PEG10-DMR甲基化不参与人肝癌细胞PEG10的印记调控,但可调控其表达水平.
作者:高燕;张厚德;张美平;张荣刚;林菊生
来源:胃肠病学和肝病学杂志 2012 年 21卷 11期