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目的 探究miR-21对结直肠癌细胞生物学行为的影响以及潜在调控机制.方法 利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结直肠癌组织中miR-21和TET1的表达水平并分析其相关性;利用生物信息学网站预测miR-21潜在靶基因TET1,利用双荧光素酶实验进行验证;利用细胞转染实验对两种结直肠癌细胞株进行miR-21 mimics、miR-21 inhibitor、si-TET1及相关对照的细胞转染,采用CCK-8分析、Transwell实验及细胞划痕实验检测转染后细胞增殖、侵袭及迁移能力的变化;利用Western blotting实验检测转染后细胞中TET1蛋白的表达.结果 qRT-PCR结果显示,结直肠癌组织中miR-21呈高表达水平,TET1 mRNA呈低表达水平,且两者表达水平呈负相关.靶基因预测及验证实验结果显示TET1是miR-21的靶基因,miR-21表达引起结直肠癌细胞中TET1表达下调.细胞转染实验结果显示,miR-21促进细胞增殖、侵袭及迁移.Western blotting实验结果显示,转染miR-21 mimics抑制TET1蛋白表达,转染miR-21 inhibitor促进TET1蛋白表达.结论 miR-21通过靶向调控TET1促进结直肠癌细胞的增殖、侵袭及迁移.

作者:梁国刚;林丽丽;王豆豆

来源:胃肠病学和肝病学杂志 2020 年 29卷 7期

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作者:
梁国刚;林丽丽;王豆豆
来源:
胃肠病学和肝病学杂志 2020 年 29卷 7期
标签:
miR-21 结直肠癌 TET1
目的 探究miR-21对结直肠癌细胞生物学行为的影响以及潜在调控机制.方法 利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结直肠癌组织中miR-21和TET1的表达水平并分析其相关性;利用生物信息学网站预测miR-21潜在靶基因TET1,利用双荧光素酶实验进行验证;利用细胞转染实验对两种结直肠癌细胞株进行miR-21 mimics、miR-21 inhibitor、si-TET1及相关对照的细胞转染,采用CCK-8分析、Transwell实验及细胞划痕实验检测转染后细胞增殖、侵袭及迁移能力的变化;利用Western blotting实验检测转染后细胞中TET1蛋白的表达.结果 qRT-PCR结果显示,结直肠癌组织中miR-21呈高表达水平,TET1 mRNA呈低表达水平,且两者表达水平呈负相关.靶基因预测及验证实验结果显示TET1是miR-21的靶基因,miR-21表达引起结直肠癌细胞中TET1表达下调.细胞转染实验结果显示,miR-21促进细胞增殖、侵袭及迁移.Western blotting实验结果显示,转染miR-21 mimics抑制TET1蛋白表达,转染miR-21 inhibitor促进TET1蛋白表达.结论 miR-21通过靶向调控TET1促进结直肠癌细胞的增殖、侵袭及迁移.