目的:通过体外研究醛固酮( ALD)和蟾蜍灵( Bufalin)作用于大鼠系膜细胞后自噬与凋亡的变化,探讨自噬在醛固酮诱导系膜细胞凋亡中的作用,进而说明醛固酮参与肾损伤的可能机制。方法:体外培养大鼠系膜细胞,分别应用醛固酮、蟾蜍灵、氯喹(CQ)作用于系膜细胞,实验分为a:对照组、b:ALD组(10-6 mol/L醛固酮),c:Bufalin组(10-8 mol/L 蟾蜍灵),d:ALD+Bufalin组(10-6 mol/L醛固酮+10-8mol/L蟾蜍灵),e:ALD+CQ组(10-6 mol/L醛固酮+10μmol /L氯喹),f:ALD+Bufa-lin+CQ组(10-6 mol/L醛固酮+10-8 mol/L蟾蜍灵+10μmol /L氯喹);应用透射电镜观察各组大鼠系膜细胞的自噬水平;应用Western Blot检测各组自噬标志蛋白P62、LC3表达的变化;应用An-nexin V /PI双染流式细胞术检测各组大鼠系膜细胞凋亡的变化。结果:透射电镜下:a组和c组未见典型自噬体,b组可见典型自噬体,d组自噬体数目小于b组,e组、f组自噬体数目均明显高于各组;Western Blot检测P62、LC3蛋白表达结果显示:c组表达量与a组基本相同,b组较a、c组升高(P<0.05);d组较b组下降(P<0.05);e组f、组表达量基本相当,且显著高于各组(P<0.05);流式细胞仪检测凋亡结果显示:c组细胞凋亡
作者:曲高婷;张爱青;施会敏;甘卫华
来源:皖南医学院学报 2016 年 35卷 2期