应用膜反向斑点杂交技术快速检测结核分支杆菌对乙胺丁醇(EMB)耐药性.设计与合成用于检测结核分支杆菌耐EMB基因embB的寡核苷酸探针,点于硝酸纤维素膜上,与结核分支杆菌临床分离株生物素标记的聚合酶链反应(PCR)产物进行反向斑点杂交,并与PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)和PCR-直接测序(PCR-DS)结果比较.对81株结核分支杆菌临床分离株进行分析,31株EMB敏感株中,26株embB基因的SSCP图谱、膜反向斑点杂交结果与标准株(H37Rv)完全相同;其余5株SSCP图谱出现泳动变位,其中3株E1b杂交阳性,PCR-DS分析为embB基因306位密码子ATG→GTG突变;2株E1d杂交阳性,PCR-DS分析为embB基因306位密码子ATG→ATA突变.50株耐EMB菌株中,24株PCR-SSCP 图谱与标准菌株相同,E1杂交阳性;26株PCR-SSCP图谱出现泳动变位,其中18株E1b杂交阳性,2株E1c杂交阳性,5株E1d杂交阳性,1株E1e杂交阳性,未发现E1f杂交阳性,与PCR-SSCP、PCR-DS分析结果一致.突变检出率为52
作者：梁建琴；吴雪琼；曹立雪；李洪敏；张俊仙
来源：微生物学报 2004 年 44卷 2期
