[目的]初步研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)NCTC 11637 cagT(HP0532)基因对SGC-7901细胞增殖和白细胞介素-8(IL-8)分泌的影响.[方法]应用PCR技术从H.pylori基因组DNA中扩增cagT编码基因片段,将其定向插入pQE30载体中,双酶切鉴定筛选阳性克隆.测序分析确认后,IPTG诱导表达,表达蛋白以Ni2+-NTA柱进行纯化,并经Western blot鉴定,纯化的蛋白作用于SGC-7901细胞,提取细胞总RNA,RT-PCR扩增IL-8,并用MTT法检测蛋白对细胞增殖的影响.[结果]成功克隆了cagT基因,全长843bp(GenBank 登录号为 EF114758),编码280个氨基酸,与GenBank公布的其他H.pylori菌株基因序列的核苷酸同源性为97
作者:崔蕾蕾;邵世和;李良菊;王华;母润红;鞠小丽;董苏荣;钟桥
来源:微生物学报 2008 年 48卷 4期