[目的]研究抗菌肽P7抑制大肠杆菌的非膜作用机制.[方法]P7与溴化乙锭竞争结合大肠杆菌基因组DNA的荧光光谱,分析P7与DNA的结合方式;流式细胞术分析P7与大肠杆菌基因组DNA结合对细菌细胞周期的影响;采用磁珠富集和PCR扩增相结合的方法分析P7特异结合的DNA序列;通过实时荧光定量PCR分析P7对大肠杆菌DNA复制和SOS损伤修复基因表达的影响;核酸染料的荧光分析研究P7对大肠杆菌DNA和RNA合成的影响.[结果]P7以嵌插的方式作用于大肠杆菌基因组DNA碱基对并形成肽-DNA复合物,使溴化乙锭-DNA复合体系的荧光强度减弱.P7可以显著增加大肠杆菌细胞周期中S期细胞数目,抑制大肠杆菌DNA复制.P7特异性结合rnhA使该基因表达水平显著下调2.24倍.同时,在肽的影响下参与大肠杆菌DNA复制相关的ssb、dnaG、ligB和rnhA基因的表达水平显著下调(P＜0.05),DNA损伤修复的recA和recN基因显著上调(P＜0.05).P7可降低大肠杆菌DNA和RNA的合成.[结论]P7特异性地结合rnhA序列引起大肠杆菌DNA的损伤并抑制大肠杆菌的DNA复制.在P7的影响下,参与大肠杆菌DNA复制相关的基因的表达水平下调,DNA损伤修复基因显著上调,同时抑制大肠杆菌DNA和RNA的合成.
作者：陈旋；李莉蓉
来源：微生物学报 2016 年 56卷 11期
