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[目的]为进一步研究镰刀菌Q7-31T产生的植物细胞壁降解酶的酶系信息.[方法]以1%(W/V)蛋白胨为氮源,0.5%(W/V)燕麦秸秆为碳源,20C、120 r/min振荡培养3d,诱导发酵培养菌株,获得的粗酶液经过Sephacry S-100凝胶柱层析和DEAE琼脂糖弱阴离子交换柱层析,最终得到纯化的内切葡聚糖酶,并对其进行酶学性质分析及串联质谱鉴定.[结果]研究表明:Egn21的分子质量为44.25 kDa,等电点为4.91;酶学特性研究显示:Egn21降解羧甲基纤维素的最适反应温度为40C,在45C以下比较稳定.该酶最适pH为6.0,在pH为5.0-8.0条件之间比较稳定.Co2+、Zn2+和Mg2+对其没有明显作用,而Fe2+、Ca2+、K+、Na+和Mn2+对酶活性有抑制作用,Hg2+会使酶失去活性.[结论]从Q7-31T中分离纯化得到的内切葡聚糖酶Egn21,经过酶学特性与串联质谱鉴定结果显示其属于GH5家族.

作者:常鑫园;谢占玲;张凤梅;雷洁琼;崔荣伟;聂守一

来源:微生物学报 2017 年 57卷 1期

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作者:
常鑫园;谢占玲;张凤梅;雷洁琼;崔荣伟;聂守一
来源:
微生物学报 2017 年 57卷 1期
标签:
镰刀菌 内切葡聚糖酶 分离纯化 鉴定 酶学特性 Fusarium sp. endoglucanase protein purification identification enzymatic properties
[目的]为进一步研究镰刀菌Q7-31T产生的植物细胞壁降解酶的酶系信息.[方法]以1%(W/V)蛋白胨为氮源,0.5%(W/V)燕麦秸秆为碳源,20C、120 r/min振荡培养3d,诱导发酵培养菌株,获得的粗酶液经过Sephacry S-100凝胶柱层析和DEAE琼脂糖弱阴离子交换柱层析,最终得到纯化的内切葡聚糖酶,并对其进行酶学性质分析及串联质谱鉴定.[结果]研究表明:Egn21的分子质量为44.25 kDa,等电点为4.91;酶学特性研究显示:Egn21降解羧甲基纤维素的最适反应温度为40C,在45C以下比较稳定.该酶最适pH为6.0,在pH为5.0-8.0条件之间比较稳定.Co2+、Zn2+和Mg2+对其没有明显作用,而Fe2+、Ca2+、K+、Na+和Mn2+对酶活性有抑制作用,Hg2+会使酶失去活性.[结论]从Q7-31T中分离纯化得到的内切葡聚糖酶Egn21,经过酶学特性与串联质谱鉴定结果显示其属于GH5家族.