目的：为提高生产效率、增加原代地鼠肾细胞单产量及狂犬病病毒产量，建立人用狂犬病疫苗（地鼠肾细胞）连续培养多次收获工艺。方法选用12～14日龄SPF地鼠，无菌取肾经消化，制备成细胞悬液，分装到40层细胞工厂并培养细胞成单层；接种狂犬病病毒固定毒aG株，连续培养病毒并多次收获。分别对同一细胞批制备的多个单次病毒收获液的免疫原性、病毒滴度和地鼠肾细胞蛋白质含量进行检测。结果用40层细胞工厂培养原代地鼠肾细胞和狂犬病病毒，细胞接种浓度为1．0×106～1．5×106cells /mL，（36±1）℃培养72 h成致密单层；按0．1 MOI病毒接种，可进行6次收获病毒；多个单次病毒收获液病毒滴度均不低于6．0 lgLD50/mL；免疫原性检查保护指数不低于100；地鼠肾细胞蛋白质残留量随着收获次数的增加而不断降低。结论用细胞工厂建立了人用狂犬病疫苗连续培养多次收获工艺，能显著提高地鼠肾单产量，增加产能。
作者：李红芳；赵祖波；任红卫；杨淼；马超；辛军；龚健；李守丽；于滢；徐枫
来源：微生物学免疫学进展 2013 年 6期
