沙门氏菌(Salmonella sp.)、志贺氏菌(Shigella sp.)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)、肠出血型大肠杆菌0157(Eterohaemorrhagic 0157)和副溶血弧菌(Vibrio rahaemolyticus)是5种饮用水中不得检出食源性致病菌,根据它们的毒素基因、高度保守基因及特异性基因,设计合成5对寡核苷酸引物,应用PCR技术对10个属的30株细菌进行引物特异性检测.通过对多重PCR反应体系、条件进行优化,显著提高了检测灵敏度.初步应用于水样分析中,极大的缩短了检测时间、降低了成本.实验结果表明:5对寡核苷酸引物都具较高的特异性和专一性,多重PCR检测灵敏度达到101~102cfu,检测需5~6h,在水样检测的初步应用中得到了均一、稳定、清晰的结果,可推广应用于环境监测、水源检测、食品卫生监督、商品检验检疫等领域.
作者:范宏英;吴清平;吴若菁;寇晓霞;张菊梅;吴慧清
来源:微生物学通报 2005 年 32卷 3期