根据马铃薯病毒PVX、PVY、PVA、PLRV 的CP 基因序列设计4 对特异性引物,通过对试剂浓度和反应条件进行优化,建立了能够同步检测PVX、PVY、PVA、PLRV 的一步法多重RT-PCR 检测方法.该方法对PVX、PVY、PVA、PLRV 扩增出的靶带大小分别为732、422、132和336 bp,凝胶电泳易辨别区分.病毒RNA 最低检测限度为7.8 pg/μL,对PVM、PVS、AMV、TMV 及PSTVd 的扩增为阴性.研究结果表明,该方法特异、灵敏,比两步法多重RT-PCR 检测更加快速、简便,提高了检测效率,降低检测成本,为马铃薯病毒的高效检测提供了有效手段.
作者：董代幸；张祥林；罗明；韩剑；冯世强；唐德贤；岳仲海
来源：微生物学通报 2011 年 1期
