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sRNA(Small non-coding RNA,sRNA)为新近发现的基因表达调控分子,转录后水平调控靶基因表达,在细菌毒力、应激及对外界环境感应方面起调控作用.沙门氏菌是一种重要的人畜共患病病原菌,可引起人类食物中毒、败血症及伤寒等.以肠炎型沙门氏菌为模型,研究sRNA(istR)在肠炎沙门氏菌抗活性氮氧中的作用,为沙门氏菌的防治提供新方向.参考已报道的沙门氏菌全基因组及istR序列,设计引物,PCR扩增istR突变用基因片段,运用Red同源重组系统对肠炎沙门氏菌(SE2472)的istR基因进行定点敲除,构建敲除菌株(SE2472ΔistR),比较野生株和敲除株对活性氮氧的敏感性;构建回复表达质粒pHDB3-istR,将其转入istR敲除株构建回复株SE2472ΔistR-comp,以回复表达istR,分析istR表达对沙门氏菌istR敲除株抵抗活性氮氧的回复作用.活性氮抑菌结果表明,SE2472在pH 5.0、NaNO<,2>浓度为20 mmol/L的LB液体培养基中培养3 h,存活率为20.40

作者:曹学松;蒋惠源;曹鸣辉;顾宏伟;曾科

来源:微生物学通报 2011 年 38卷 8期

知识库介绍

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作者:
曹学松;蒋惠源;曹鸣辉;顾宏伟;曾科
来源:
微生物学通报 2011 年 38卷 8期
标签:
沙门氏菌 sRNA 基因敲除 活性氧 活性氮
sRNA(Small non-coding RNA,sRNA)为新近发现的基因表达调控分子,转录后水平调控靶基因表达,在细菌毒力、应激及对外界环境感应方面起调控作用.沙门氏菌是一种重要的人畜共患病病原菌,可引起人类食物中毒、败血症及伤寒等.以肠炎型沙门氏菌为模型,研究sRNA(istR)在肠炎沙门氏菌抗活性氮氧中的作用,为沙门氏菌的防治提供新方向.参考已报道的沙门氏菌全基因组及istR序列,设计引物,PCR扩增istR突变用基因片段,运用Red同源重组系统对肠炎沙门氏菌(SE2472)的istR基因进行定点敲除,构建敲除菌株(SE2472ΔistR),比较野生株和敲除株对活性氮氧的敏感性;构建回复表达质粒pHDB3-istR,将其转入istR敲除株构建回复株SE2472ΔistR-comp,以回复表达istR,分析istR表达对沙门氏菌istR敲除株抵抗活性氮氧的回复作用.活性氮抑菌结果表明,SE2472在pH 5.0、NaNO<,2>浓度为20 mmol/L的LB液体培养基中培养3 h,存活率为20.40