[目的]通过前期体外诱导获得耐万古霉素金黄色葡萄球菌,从基因突变方面对万古霉素耐药性菌株进行研究.[方法]通过低浓度万古霉素逐步诱导13株敏感性金黄色葡萄球菌,用琼脂稀释法和E-test法检测所有菌株对万古霉素的耐药性(最低抑菌浓度,MIC),PCR扩增与万古霉素耐药性密切相关的4个重要基因:rpoB、vraS、graR和graS,并测序分析,比较诱导前后不同菌株的基因序列.[结果]通过60d的体外诱导实验,13株对万古霉素敏感性金黄色葡萄球菌中有6株被诱导为中介耐药金黄色葡萄球菌(Vancomycin intermediate Staphylococcus aureus,VISA),7株菌被诱导之后对万古霉素仍处于敏感状态,MIC＜4 mg/L.检测诱导前后所有菌株的rpoB、vraS、graR和graS基因发现:有3株VISA的rpoB基因同时有L466S和H481N的突变,graS基因同时有R232K的突变.[结论]对万古霉素敏感的金黄色葡萄球菌经过较长时间的体外诱导可发展为VISA.在已检测的重要基因中,rpoB和graS的突变对耐药性的发展很可能起关键作用,而vraS和graR对这一过程没有显著影响.
作者：王玉冰；李晓丽；王伟轩；陈南；何晓青；金一；谢响明
来源：微生物学通报 2016 年 43卷 11期
