[目的]获得具有结肠靶向的纳米载体.[方法]采用SOE-PCR方法将具有结肠靶向的TK肽序列插入到猪细小病毒(PPV)结构蛋白VP2的环2和环4区域得到TK-vp2(△vp2)基因,在Bac-to-Bac(R)杆状病毒表达系统中构建、表达和自组装.[结果]通过SOE-PCR方法扩增获得△vp2基因,在Bac-to-Bac(R)杆状病毒表达系统中构建得到Bacmid-△vp2,经脂质体转染至Sf9昆虫细胞得到重组杆状病毒.直接免疫荧光试验、SDS-PAGE和Western blot检测结果表明△VP2蛋白在Bac-to-Bac(R)杆状病毒表达系统中获得融合表达,目的蛋白约70 kD;透射电子显微镜结果显示△VP2能自组装形成病毒样颗粒(TK-VLPs),直径范围在22 nm-30 nm.[结论]获得纳米载体TK-VLPs,为进一步研究其作为结肠靶向的纳米载体奠定物质基础.
作者:吴丹丹;周玉龙;任亚超;王新
来源:微生物学通报 2017 年 44卷 10期