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[背景]EB病毒是一个常见的病原,它能引起霍奇金淋巴瘤、伯基特淋巴瘤以及胃癌、鼻咽癌.该病毒编码的膜蛋白BNLF2a抑制抗原转运蛋白TAP (Transporter associated with antigen processing)从而逃逸T细胞的清除.TAP属于ABC (ATP-binding cassette)转运蛋白超家族,是由TAP1和TAP2两个亚基构成的.TAP通过ATP提供能量,跨膜转运抗原多肽,这一过程伴随着构象变化.[目的]旨在揭示BNLF2a是否影响TAP的构象变化.[方法]TAP蛋白核酸结合结构域的二聚体界面的D-loop进行点突变,引入半胱氨酸.在表达和不表达BNLF2a情况下,采用氧化性的二价铜离子交联半胱氨酸,并通过Westem blot对比TAP的半胱氨酸形成二硫键的比例.[结果]BNLF2a表达使TAP被交联的比例增高.[结论]BNLF2a可能将TAP稳定在核苷酸结合结构域二聚化的构象,从而同时抑制ATP和抗原多肽结合到TAP上来.

作者:尹利敏;林嘉成

来源:微生物学通报 2019 年 46卷 6期

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作者:
尹利敏;林嘉成
来源:
微生物学通报 2019 年 46卷 6期
标签:
EB病毒 BNLF2a TAP ABC转运蛋白 抗原多肽
[背景]EB病毒是一个常见的病原,它能引起霍奇金淋巴瘤、伯基特淋巴瘤以及胃癌、鼻咽癌.该病毒编码的膜蛋白BNLF2a抑制抗原转运蛋白TAP (Transporter associated with antigen processing)从而逃逸T细胞的清除.TAP属于ABC (ATP-binding cassette)转运蛋白超家族,是由TAP1和TAP2两个亚基构成的.TAP通过ATP提供能量,跨膜转运抗原多肽,这一过程伴随着构象变化.[目的]旨在揭示BNLF2a是否影响TAP的构象变化.[方法]TAP蛋白核酸结合结构域的二聚体界面的D-loop进行点突变,引入半胱氨酸.在表达和不表达BNLF2a情况下,采用氧化性的二价铜离子交联半胱氨酸,并通过Westem blot对比TAP的半胱氨酸形成二硫键的比例.[结果]BNLF2a表达使TAP被交联的比例增高.[结论]BNLF2a可能将TAP稳定在核苷酸结合结构域二聚化的构象,从而同时抑制ATP和抗原多肽结合到TAP上来.