启动子Ptac与PsbA在鱼腥藻7120中表达hG-CSF的效率比较-临床诊疗知识库

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作者：

宁文艳；吴先敏；王春梅；陈伟东；施定基

来源：

微生物学杂志 2014 年 34卷 3期

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鱼腥藻7120 人粒细胞集落刺激因子 Ptac PsbA 表达 Anabaena sp.7120 human granulocyte colony stimulating factor (hG-CSF) Ptac PsbA expression

为了比较外源性启动子Ptac与内源性启动子PsbA在鱼腥藻7120中表达外源基因时的效率,构建了分别含Ptac和PsbA两种启动子的穿梭表达载体pRL-PsbA-GCSF、pRL-Tac-GCSF;利用三亲结合转移法转化鱼腥藻7120,利用抗生素筛选,通过质粒提取和PCR方法鉴定,获得了分别由2种启动子驱动表达hG-CSF的转基因蓝藻,转基因藻中目的基因以质粒形式存在;利用半定量RT-PCR方法对2种转基因藻的hG-CSF转录水平进行比较,发现PsbA启动子驱动效率与Ptac启动子没有明显差异;利用ELISA方法比较hG-CSF蛋白表达量,发现PsbA启动的蓝藻中hG-CSF表达量是Ptac诱导条件下表达量的1.17倍.

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