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应用依赖随机化末端连接物PCR(Randomized Terminal Linker-dependent PCR ,RDPCR)技术于体内试验的研究,从而检测特定基因的DNA损伤.腹腔注射重铬酸钾染毒大鼠,提取肺组织基因组DNA,经p53基因外显子7特异性引物P1重复直线延伸后与接头(Linker)连接,用基因特异性引物P2和连接物引物经PCR扩增,电泳、转印,再与地高辛标记的探针杂交后显色.结果显示,在20.0 mg/kg和40.0mg/kg剂量下,出现了两条清晰的杂交带,表明重铬酸钾可引起大鼠肺p53基因外显子7的DNA损伤,且有两个损伤位点.此结果有助于进一步探讨六价铬化合物的致突变机制,同时也拓展了RDPCR技术在毒理学领域的应用.

作者:熊开容;张治位;衡正昌

来源:卫生研究 2003 年 32卷 3期

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作者:
熊开容;张治位;衡正昌
来源:
卫生研究 2003 年 32卷 3期
标签:
连接物聚合酶链反应 DNA损伤 体内试验 p53基因 重铬酸钾
应用依赖随机化末端连接物PCR(Randomized Terminal Linker-dependent PCR ,RDPCR)技术于体内试验的研究,从而检测特定基因的DNA损伤.腹腔注射重铬酸钾染毒大鼠,提取肺组织基因组DNA,经p53基因外显子7特异性引物P1重复直线延伸后与接头(Linker)连接,用基因特异性引物P2和连接物引物经PCR扩增,电泳、转印,再与地高辛标记的探针杂交后显色.结果显示,在20.0 mg/kg和40.0mg/kg剂量下,出现了两条清晰的杂交带,表明重铬酸钾可引起大鼠肺p53基因外显子7的DNA损伤,且有两个损伤位点.此结果有助于进一步探讨六价铬化合物的致突变机制,同时也拓展了RDPCR技术在毒理学领域的应用.