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目的建立能在12小时内同时快速检测沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157∶H7的多重PCR体系.方法碱性蛋白胨水(BPW)非选择性增菌6h;100℃10min制备DNA模板;根据大肠杆菌O157∶H7的uidA基因、志贺菌的ipaH基因及沙门菌的invA基因序列设计各菌引物,进行PCR扩增及电泳检测.同时优化反应体系,测定体系灵敏度和特异性.结果该多重PCR体系能在12h内同时检测3种目的菌;灵敏度为10~30cfu/ml;通过对23株目的菌和15株非目的菌检测,提示该体系特异性高.结论初步探讨出能在12h内快速、灵敏、特异地同时测定沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157∶H7的多重PCR体系.

作者:何超;樊学军;汪东篱;刘丽英;王翠苹;裴晓方

来源:卫生研究 2005 年 34卷 6期

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作者:
何超;樊学军;汪东篱;刘丽英;王翠苹;裴晓方
来源:
卫生研究 2005 年 34卷 6期
标签:
多重PCR 沙门菌 志贺菌 大肠杆菌O157∶H7
目的建立能在12小时内同时快速检测沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157∶H7的多重PCR体系.方法碱性蛋白胨水(BPW)非选择性增菌6h;100℃10min制备DNA模板;根据大肠杆菌O157∶H7的uidA基因、志贺菌的ipaH基因及沙门菌的invA基因序列设计各菌引物,进行PCR扩增及电泳检测.同时优化反应体系,测定体系灵敏度和特异性.结果该多重PCR体系能在12h内同时检测3种目的菌;灵敏度为10~30cfu/ml;通过对23株目的菌和15株非目的菌检测,提示该体系特异性高.结论初步探讨出能在12h内快速、灵敏、特异地同时测定沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157∶H7的多重PCR体系.