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目的 构建人谷胱甘肽硫转移酶A1(GSTA1)的CHO细胞表达体系.方法 重组质粒pDNA3.1-GSTA1用lipofectamineTM 2000转染CHO细胞,用G418筛选细胞的阳性克隆,并用PCR、RT-PCR和Western blot进行鉴定,测定GSTA1酶活性.结果 将pDNA3.1-GSTA1转染CHO细胞,用G418筛选,用PCR、RT-PCR和Westem blot进行鉴定,表明GSTA1基因已转染到CHO细胞的基因组,并转录表达,生成GSTA1蛋白质,经测定活性达到35mmol/(mg·min蛋白).结论 CHO-GSTA1细胞表达,为基因工程生产具有完整功能GST A1的进一步纯化提供了材料.

作者:陈萍萍;王旗;李文杰;崔玲玲;李宁;谢东

来源:卫生研究 2007 年 36卷 1期

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作者:
陈萍萍;王旗;李文杰;崔玲玲;李宁;谢东
来源:
卫生研究 2007 年 36卷 1期
标签:
谷胱甘肽硫转移酶A1 CHO细胞 转染 转移酶
目的 构建人谷胱甘肽硫转移酶A1(GSTA1)的CHO细胞表达体系.方法 重组质粒pDNA3.1-GSTA1用lipofectamineTM 2000转染CHO细胞,用G418筛选细胞的阳性克隆,并用PCR、RT-PCR和Western blot进行鉴定,测定GSTA1酶活性.结果 将pDNA3.1-GSTA1转染CHO细胞,用G418筛选,用PCR、RT-PCR和Westem blot进行鉴定,表明GSTA1基因已转染到CHO细胞的基因组,并转录表达,生成GSTA1蛋白质,经测定活性达到35mmol/(mg·min蛋白).结论 CHO-GSTA1细胞表达,为基因工程生产具有完整功能GST A1的进一步纯化提供了材料.