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目的 探讨细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)/c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinases,JNK)在炭黑诱导的人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblasts,HELF)毒性中对激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)信号通路的作用.方法 分别在含0、15、30、60、120和240 μg/mL炭黑的RPMI 1640培养液中培养HELF细胞24 h,用噻唑蓝比色法确定炭黑致HELF细胞毒性的剂量.100 μg/mL炭黑分别处理HELF细胞(CB)、转染ERK显性失活突变体质粒(DN-ERK)HELF细胞(CB-DN-ERK)、转染JNK显性失活突变体质粒(DN-JNK)HELF细胞(CB-DN-JNK),同时设立细胞不做任何处理的对照组.CB组在染毒0、1、2、4、8、12、24和36 h 用 Western blot 实验检测 ERK、JNK、p38、c-Jun、c-Fos 及其磷酸化水平,用荧光素酶法检测其AP-1活性.CB-DN-JNK和CB-DN-JNK组在染毒24h用荧光素酶法检测AP-1活性,用Western blot实验检测ERK、JNK、c-Jun、c-Fos及其磷酸化水平.结果 CB组ERK和p-ERK蛋白表达水平在1~36 h各时间点均大于0h时,而p38蛋白在1~36h各时间点均小于0h时;AP-1活性在8h时下调至最低(0.72±0.12),在36 h 时则上调至峰值(1.38±0.11);c-Fos、p-c-Fos、c-Jun蛋白表达水平在染毒1~24 h各时间点均大于0 h

作者:康宁;张夏男;刘凯;钱源源;戴宇飞;宋佳阳;郑玉新;叶萌

来源:卫生研究 2021 年 50卷 4期

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作者:
康宁;张夏男;刘凯;钱源源;戴宇飞;宋佳阳;郑玉新;叶萌
来源:
卫生研究 2021 年 50卷 4期
标签:
炭黑 细胞外信号调节激酶 c-Jun氨基末端激酶 激活蛋白-1 人胚肺成纤维细胞
目的 探讨细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)/c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinases,JNK)在炭黑诱导的人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblasts,HELF)毒性中对激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)信号通路的作用.方法 分别在含0、15、30、60、120和240 μg/mL炭黑的RPMI 1640培养液中培养HELF细胞24 h,用噻唑蓝比色法确定炭黑致HELF细胞毒性的剂量.100 μg/mL炭黑分别处理HELF细胞(CB)、转染ERK显性失活突变体质粒(DN-ERK)HELF细胞(CB-DN-ERK)、转染JNK显性失活突变体质粒(DN-JNK)HELF细胞(CB-DN-JNK),同时设立细胞不做任何处理的对照组.CB组在染毒0、1、2、4、8、12、24和36 h 用 Western blot 实验检测 ERK、JNK、p38、c-Jun、c-Fos 及其磷酸化水平,用荧光素酶法检测其AP-1活性.CB-DN-JNK和CB-DN-JNK组在染毒24h用荧光素酶法检测AP-1活性,用Western blot实验检测ERK、JNK、c-Jun、c-Fos及其磷酸化水平.结果 CB组ERK和p-ERK蛋白表达水平在1~36 h各时间点均大于0h时,而p38蛋白在1~36h各时间点均小于0h时;AP-1活性在8h时下调至最低(0.72±0.12),在36 h 时则上调至峰值(1.38±0.11);c-Fos、p-c-Fos、c-Jun蛋白表达水平在染毒1~24 h各时间点均大于0 h