目的 建立快速、准确检测血清中25-羟基维生素D3[25-hydroxyvitamin D3,25(OH)D3]、25-羟基维生素 D2[25-hydroxyvitamin D2,25(OH)D2]含量的柱前衍生-稳定同位素标记-超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱的方法,并用此方法诊断维生素D缺乏症,评估人群维生素D营养状况.方法 加入同位素内标的血清样品采用乙酸乙酯-正己烷溶液(2:1,V/V)提取,离心后氮气吹干,以4-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(4-phenyl-1,2,4-triazoline-3,5-dione,PTAD)作为衍生化试剂与目标化合物进行衍生化反应.反应产物采用BEH C18色谱柱(2.1 mmx50 mm,1.7 μm)进行分离,以0.1％甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱.质谱采用电喷雾正离子模式和平行反应监测对目标物进行检测,内标法定量.结果 25(OH)D3和25(OH)D2的检出限为0.01 ng/mL,定量限为0.03 ng/mL.25(OH)D2浓度的线性范围为0.5～40.0 ng/mL,25(OH)D3浓度的线性范围为2.5～200.0 ng/mL,二者在浓度范围内线性良好,相关系数(r2r)大于0.995.25(OH)D3和25(OH)D2的回收率分别为95.7％～101.3％和 98.7％～108.6％,相对标准偏差分别为 0.5％～4.9％和 2.2％～3.4％(n=5).测定参考物质NIST SRM 972a的Level 2血清中25(OH)D3和25(OH)D2的准确度分别为104.8％和94.9％.利用该方法检测北京市116

作者：韩枫；王雨昕；李敬光；李孜孜；慕迪；何丽；张坚

来源：卫生研究 2023 年 52卷 1期