目的:探讨黄芪注射液(AI)对肺泡上皮细胞钠离子通道(ENaC)表达的影响及其作用机制。方法:选择典藏 A549细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测 AI 对其增殖的影响,采用 Western Blot 筛查 AI 促进ENaC蛋白各亚基(α、β、γ)高水平表达的最佳浓度和最佳作用时间。继而将培养 A549细胞分为自身空白对照组、AI组、抑制剂组和 AI+抑制剂组,在对应培养细胞中加入不同抑制剂孵育2h,再加入 AI孵育12h后,采用 West-ern Blot检测抑制剂 AG490、PDTC、SB203580和 Wortmannin对 AI处理的 A549细胞中α、β、γENaC蛋白表达的影响,统计比较它们之间的差异。结果:AI对 A549细胞的增殖无明显影响,但能上调α-ENaC、β-ENaC和γ-ENaC的表达,最佳浓度为8mg/ml,最佳作用时间为12h。PDTC 可抑制 AI 上调的β-ENaC(t=3.01,P<0.05)和γ-ENaC(t=4.53,P<0.05)表达。其它抑制剂不能抑制 AI上调的各亚基 ENaC表达。结论:AI可通过 NF-κB信号通路增加 A549细胞的 ENaC表达;对研究 AI调节肺内水钠平衡,防治肺水肿等有积极作用。
作者:王敏;李柯;魏蕾;刘永明
来源:微循环学杂志 2014 年 4期