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目的:探究微小RNA-146b-5p(miR-146b-5p)在小胶质细胞糖氧剥夺/复氧损伤(OGD/R)中的作用及机制.方法:建立小鼠小胶质细胞系EOC 13.31的OGD/R模型.将miR-146b-5p模拟物、miR-146b-5p抑制剂及相应的阴性对照,分别转染至EOC 13.31细胞中,然后再分别进行OGD/R处理,分别命名为OGD/R+miR-146b-5p mimic 组、OGD/R+miR-146b-5p inhibitor 组、OGD/R+NC mimic 组和OGD/R+NC inhibitor 组,以常规培养的细胞为对照组(Control组),只行OGD/R处理的细胞为OGD/R组,48h后检测相关指标.实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-146b-5p表达;采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞存活率;原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率;酶联免疫吸附法(ELISA)测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)含量;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测TRAF6蛋白表达;生物信息学和双荧光素酶报告基因实验分析miR-146b-5p和TRAF6之间的关系.结果:与Control组相比,OGD/R组中miR-146b-5p表达显著下调(P<0.01),TRAF6蛋白表达显著上调(P<0.01).与OGD/R+NC mimic组比较,OGD/R+miR-146b-5p mimic组细胞存活率显著增高,凋亡率显著降低,MDA含量显著降低,S

作者:黄松;汪雷;周有东;胡火军;董元训;马金阳

来源:微循环学杂志 2022 年 32卷 1期

知识库介绍

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作者:
黄松;汪雷;周有东;胡火军;董元训;马金阳
来源:
微循环学杂志 2022 年 32卷 1期
标签:
miR-146b-5p;TRAF6;糖氧剥夺/复氧损伤;氧化应激;炎症反应
目的:探究微小RNA-146b-5p(miR-146b-5p)在小胶质细胞糖氧剥夺/复氧损伤(OGD/R)中的作用及机制.方法:建立小鼠小胶质细胞系EOC 13.31的OGD/R模型.将miR-146b-5p模拟物、miR-146b-5p抑制剂及相应的阴性对照,分别转染至EOC 13.31细胞中,然后再分别进行OGD/R处理,分别命名为OGD/R+miR-146b-5p mimic 组、OGD/R+miR-146b-5p inhibitor 组、OGD/R+NC mimic 组和OGD/R+NC inhibitor 组,以常规培养的细胞为对照组(Control组),只行OGD/R处理的细胞为OGD/R组,48h后检测相关指标.实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-146b-5p表达;采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞存活率;原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率;酶联免疫吸附法(ELISA)测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)含量;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测TRAF6蛋白表达;生物信息学和双荧光素酶报告基因实验分析miR-146b-5p和TRAF6之间的关系.结果:与Control组相比,OGD/R组中miR-146b-5p表达显著下调(P<0.01),TRAF6蛋白表达显著上调(P<0.01).与OGD/R+NC mimic组比较,OGD/R+miR-146b-5p mimic组细胞存活率显著增高,凋亡率显著降低,MDA含量显著降低,S