目的:探讨mTOR信号通路在鼻咽癌细胞中是否激活以及mTOR抑制剂雷帕霉素对细胞增殖的调控作用.方法:利用原代培养的人类鼻咽癌细胞,采用Western blot法和免疫荧光细胞化学法检测人类鼻咽癌细胞中mTOR信号通路活化情况；采用Western blot方法检测不同浓度雷帕霉素作用24 h后细胞中S6,pS6、mTOR、pmTOR蛋白的表达量；同时用CCK8检测雷帕霉素作用24 h后细胞的存活情况.结果:West-ern blot法检测结果显示S6、pS6、mTOR、pmTOR四种蛋白在原代培养的人类鼻咽癌细胞中呈阳性表达.免疫荧光进一步证实mTOR和pmTOR两种蛋白主要表达于鼻咽癌细胞浆中.当雷帕霉素浓度为0～ 100nmol/L时,随着药物浓度增加,四种蛋白的表达量逐渐下降,相应的细胞存活率也逐渐下降.但当雷帕霉素浓度超过100 nmol/L时,药物浓度增加对鼻咽癌细胞增殖抑制的影响无明显变化.雷帕霉素浓度为0和1000 nmol/L时,鼻咽癌细胞的存活率存在较大差异.结论:mTOR信号在人类原发鼻咽癌细胞中呈激活状态,对这些细胞增殖起重要的调控作用.
作者：江文静；杨春光；彭建华；张悦；金坤林
来源：温州医学院学报 2013 年 43卷 3期
