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目的:探讨microRNA-132 (miR-132)对转化生长因子(transforming growth factor,TGF)β1刺激后大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)的细胞外基质分泌的调控作用.方法:体外培养NRK-49F细胞株,经TGF-β1 (2、3、5 ng/mL)作用24 h,或细胞转染miR-132模拟物(rno-miR-132 mimics,50 ng/mL)作用24 h,或rno-miR-132 mimics与TGF-β1共同作用24 h,茎环实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)法检测细胞miR-132表达,RT-qPCR法和Western Blot法分别检测细胞胶原蛋白Ⅰ(Collagen Ⅰ,Co1 Ⅰ)mRNA和蛋白表达.结果:①不同浓度TGF-β1刺激后NRK-49F细胞miR-132和Co1 Ⅰ的表达显著升高(P<0.01).②rno-miR-132 mimics (50 ng/mL)作用NRK-49F细胞Co1 Ⅰ表达显著升高(P<0.01).③与TGF-β1 (3 ng/mL)阳性对照组相比,rno-miR-132 mimics (50 ng/mL)与TGF-β1 (3 ng/mL)共同作用NRK-49F细胞Co1 Ⅰ表达显著升高(P<0.01).结论:miR-132可以促进TGF-β1诱导的NRK-49F细胞分泌细胞外基质.

作者:朱慧萍;苏震;周宏伟;章慧娣;黄朝兴

来源:温州医学院学报 2013 年 43卷 7期

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作者:
朱慧萍;苏震;周宏伟;章慧娣;黄朝兴
来源:
温州医学院学报 2013 年 43卷 7期
标签:
肾间质纤维化 microRNA-132 转化生长因子β1 renal interstitial fibrosis microRNA-132 transforming growth factor-β1
目的:探讨microRNA-132 (miR-132)对转化生长因子(transforming growth factor,TGF)β1刺激后大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)的细胞外基质分泌的调控作用.方法:体外培养NRK-49F细胞株,经TGF-β1 (2、3、5 ng/mL)作用24 h,或细胞转染miR-132模拟物(rno-miR-132 mimics,50 ng/mL)作用24 h,或rno-miR-132 mimics与TGF-β1共同作用24 h,茎环实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)法检测细胞miR-132表达,RT-qPCR法和Western Blot法分别检测细胞胶原蛋白Ⅰ(Collagen Ⅰ,Co1 Ⅰ)mRNA和蛋白表达.结果:①不同浓度TGF-β1刺激后NRK-49F细胞miR-132和Co1 Ⅰ的表达显著升高(P<0.01).②rno-miR-132 mimics (50 ng/mL)作用NRK-49F细胞Co1 Ⅰ表达显著升高(P<0.01).③与TGF-β1 (3 ng/mL)阳性对照组相比,rno-miR-132 mimics (50 ng/mL)与TGF-β1 (3 ng/mL)共同作用NRK-49F细胞Co1 Ⅰ表达显著升高(P<0.01).结论:miR-132可以促进TGF-β1诱导的NRK-49F细胞分泌细胞外基质.