目的:探讨肿块大体类型、分化程度、取材位置以及不同培养方法等因素对大肠癌原代细胞培养成功率的影响,寻求一种简便而高效的大肠癌原代细胞培养方法.方法:分别对选材不同的人大肠癌细胞进行胶原酶消化法、组织块法培养,并比较不同培养基、细胞培养方法和细胞纯化方法对大肠癌细胞原代培养结果的影响,倒置显微镜下观察原代细胞的生长情况,免疫细胞化学法检测细胞表面标记物的表达情况.结果:肿块增生型肿瘤标本污染较少,肿瘤中心部位取材的肿瘤细胞活性好(2例培养出满意细胞均为肿块增生型中央深部取材获得).低分化级别肿瘤短期生长可表现出明显活力,细胞数多于中分化,但长期生长结果未发现细胞数明显增多.2例培养出肿瘤细胞并顺利传代,1例分化为BroderⅡ级,1例分化为Ⅲ级.采用RPMI 1640培养基,培养瓶瓶底用鼠尾胶原包被,加入适量生长激素,用组织块培养法进行原代培养,胰酶消化法纯化细胞,简便且效果好.免疫细胞化学检测培养的细胞来源于上皮组织.结论:肿块型肿瘤的中心部位、分化较差的肿瘤细胞活性好.大肠癌细胞原代培养,用组织块培养法和胰酶消化法纯化,采用RPMI 1640培养基,培养瓶瓶底用鼠尾胶原包被并加入适量生长激素,效果较好.
作者：袁航；屠世良
来源：温州医学院学报 2013 年 43卷 12期
