目的:构建BALB/c小鼠原位肝癌模型,分离肿瘤小鼠体内的CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)和树突状细胞(DC),研究Tregs对DC功能的影响.方法:采用肝癌细胞悬液直接接种BALB/c小鼠肝脏建立原位肝癌模型.模型制作成功后25 d处死动物,无菌取出脾脏,用免疫磁珠分选法分离纯化肝癌小鼠脾脏中的Tregs、CD4+CD25-效应T细胞和DC.Tregs和效应T细胞共培养,CCK8法检测Tregs对效应T细胞增殖情况的影响.DC和Tregs直接接触共培养,用流式细胞仪检测DC表面协同刺激分子CD80/CD86表达的变化,ELISA法检测培养上清液中TNF-α、IL-12的分泌.结果:成功构建了小鼠原位肝癌模型,并分离出高纯度的Tregs、 效应T细胞和DC.Tregs在体外能抑制CD4+CD25-效应T细胞的增殖.DC和Tregs共培养时,Tregs会下调DC表面协同刺激分子CD80/CD86的表达,并抑制DC分泌IL-12和TNF-α.结论:肝癌小鼠模型中Tregs能抑制DC的功能,从而抑制机体的抗肿瘤免疫,针对Tregs进行肿瘤免疫治疗是肿瘤治疗的新策略.
作者：杜勇；黄智铭；林秀清；陈新
来源：温州医科大学学报 2017 年 47卷 10期
