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目的:探讨神经营养因子-3(NT-3)联合全反式维甲酸(RA)与β-巯基乙醇(β-BME)体外诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经元样细胞分化的差异性.方法:SD大鼠全骨髓经贴壁法培养BMSCs并传代,P3代细胞行流式细胞仪检测其表面标志物CD29、CD90及CD45的表达.P3代BMSCs用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)预诱导24 h后,再分别加入NT-3+RA和β-BME进行诱导,用免疫荧光法鉴定神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达情况.结果:①全骨髓贴壁法可以获得的细胞经流式细胞仪检测,细胞CD29和CD90阳性,CD45阴性,证实细胞为BMSCs,数量多且纯度高.②2组NSE均阳性表达,NT-3+RA组7 d阳性率高于其他时间点(P<0.01);β-BME组5 h阳性率高于1 h,NT-3+RA组1 h及5 h阳性率均低于β-BME组(均P<0.01),但β-BME组24 h后细胞大量死亡.结论:全骨髓贴壁筛选法是一种提取BMSCs的合适的方法,2种诱导方法均能在体外诱导BMSCs向神经元样细胞转化,NT-3+RA组细胞生存时间及后期阳性率均优于β-BME组.

作者:张杰;秦华丽;蒋明

来源:温州医科大学学报 2018 年 48卷 9期

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作者:
张杰;秦华丽;蒋明
来源:
温州医科大学学报 2018 年 48卷 9期
标签:
骨髓间充质干细胞 神经元样细胞 分化 大鼠
目的:探讨神经营养因子-3(NT-3)联合全反式维甲酸(RA)与β-巯基乙醇(β-BME)体外诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经元样细胞分化的差异性.方法:SD大鼠全骨髓经贴壁法培养BMSCs并传代,P3代细胞行流式细胞仪检测其表面标志物CD29、CD90及CD45的表达.P3代BMSCs用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)预诱导24 h后,再分别加入NT-3+RA和β-BME进行诱导,用免疫荧光法鉴定神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达情况.结果:①全骨髓贴壁法可以获得的细胞经流式细胞仪检测,细胞CD29和CD90阳性,CD45阴性,证实细胞为BMSCs,数量多且纯度高.②2组NSE均阳性表达,NT-3+RA组7 d阳性率高于其他时间点(P<0.01);β-BME组5 h阳性率高于1 h,NT-3+RA组1 h及5 h阳性率均低于β-BME组(均P<0.01),但β-BME组24 h后细胞大量死亡.结论:全骨髓贴壁筛选法是一种提取BMSCs的合适的方法,2种诱导方法均能在体外诱导BMSCs向神经元样细胞转化,NT-3+RA组细胞生存时间及后期阳性率均优于β-BME组.