目的:探讨GPC3在脂多糖(LPS)诱导的气道上皮细胞局部炎症微环境中的重要作用,并以GPC3-WNT通路介导的调控机制为核心进一步研究LPS诱导的肺局部炎症分子机制.方法:LPS经气道滴入小鼠后模拟肺损伤模型,检测肺泡灌洗液及肺组织中GPC3表达情况以及其表达位置.培养人肺16HBE细胞,LPS刺激16HBE细胞建立急性炎症细胞,予以RT-PCR检测其细胞中GPC3、TNF-α和TGF-β的mRNA表达情况,予以Western Blot检测GPC3、TGF-β和TNF-α蛋白表达情况.加入外源性GPC3刺激16HBE细胞,建立GPC3高表达细胞模型,检测炎症因子TNF-α和TGF-βmRNA的表达情况.不同浓度GPC3-WNT通路抑制剂处理细胞,观察上述指标变化.结果:LPS诱导ALI小鼠模型显示GPC3表达水平显著提高.此外,LPS在体外也产生了GPC3表达升高的现象.同时,外源性GPC3蛋白刺激支气管上皮细胞产生多种炎症因子,可能提示GPC3具有促炎作用.此外,GPC3诱导支气管上皮细胞系炎性细胞因子的产生被WNT-JNK通路的抑制剂阻断,提示ALI/ARDS过程中GPC3参与肺局部的潜在信号通路.结论:LPS刺激支气管上皮细胞的过程中存在一条线性信号通路即GPC3-WNT-JNK.这一发现可能为ALI/ARDS的治疗和生物标志物的开发提供一个新的分子靶点和分子机制.
作者：陈超蕾；林雨婷；张桑桑；宋晨剑；何飞；董莉；陈俊杰；王蓓蓓；董年；李玉苹；陈成水
来源：温州医科大学学报 2019 年 49卷 10期
