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目的:探讨miR-1246对人宫颈癌 SiHa细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响。方法将 SiHa细胞分成3组,分别转染miR-1246 mimics(模拟物)、miR-1246 inhibitor(抑制物)、空白质粒,并测定转染效率。采用 MTT法对比转染后SiHa细胞增殖能力的区别;Transwell小室、划痕实验对比转染后 SiHa 细胞侵袭、迁移能力的区别;Western blot 对比转染后 SiHa细胞表达THBS2(血小板反应蛋白2)的区别。构建THBS2的3’UTR双荧光素酶质粒,与miR-1246共转染入 SiHa细胞,检测荧光素酶的相对活性。结果转染 miR-1246 mimics 的 SiHa细胞,MTT 试验显示其增殖能力较另外两组强;划痕实验显示细胞的迁移能力较另两组强;迁移、侵袭实验显示该组细胞穿膜数量较另外两组多(P<0.01);WB 实验显示其 THBS2蛋白低表达(灰度值6.28±10.22,与空白对照组相比P=0.013)。转染 miR-1246 inhibitor的 SiHa细胞,MTT试验显示其生长速度较另外两组慢;划痕实验显示细胞的迁移能力较另两组弱;迁移、侵袭实验显示该组细胞穿膜数量较另外两组少(P<0.01);WB实验显示其 THBS2蛋白表达稍高(灰度值12.90±19.81,与空白对照组相比P=0.037)。共转染 miR-1246 mimics 和包含 THBS2的3’UTR 端双萤光素酶质粒后, SiHa细胞荧光素酶表达降低。结论 miR-1246对人宫

作者:陈军莹;姚德生;贺婵娟;丁楠;赵珊;李力;龙凤宜

来源:西安交通大学学报(医学版) 2015 年 2期

知识库介绍

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作者:
陈军莹;姚德生;贺婵娟;丁楠;赵珊;李力;龙凤宜
来源:
西安交通大学学报(医学版) 2015 年 2期
标签:
宫颈癌 微小 RNA-1246 血小板反应蛋白 2 SiHa细胞 增殖 侵袭 转移 cervical cell carcinoma miRNA-1246 (miR-1246) thrombospondin-2 (THBS2) SiHa cell cell proliferation cell invasion cell migration
目的:探讨miR-1246对人宫颈癌 SiHa细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响。方法将 SiHa细胞分成3组,分别转染miR-1246 mimics(模拟物)、miR-1246 inhibitor(抑制物)、空白质粒,并测定转染效率。采用 MTT法对比转染后SiHa细胞增殖能力的区别;Transwell小室、划痕实验对比转染后 SiHa 细胞侵袭、迁移能力的区别;Western blot 对比转染后 SiHa细胞表达THBS2(血小板反应蛋白2)的区别。构建THBS2的3’UTR双荧光素酶质粒,与miR-1246共转染入 SiHa细胞,检测荧光素酶的相对活性。结果转染 miR-1246 mimics 的 SiHa细胞,MTT 试验显示其增殖能力较另外两组强;划痕实验显示细胞的迁移能力较另两组强;迁移、侵袭实验显示该组细胞穿膜数量较另外两组多(P<0.01);WB 实验显示其 THBS2蛋白低表达(灰度值6.28±10.22,与空白对照组相比P=0.013)。转染 miR-1246 inhibitor的 SiHa细胞,MTT试验显示其生长速度较另外两组慢;划痕实验显示细胞的迁移能力较另两组弱;迁移、侵袭实验显示该组细胞穿膜数量较另外两组少(P<0.01);WB实验显示其 THBS2蛋白表达稍高(灰度值12.90±19.81,与空白对照组相比P=0.037)。共转染 miR-1246 mimics 和包含 THBS2的3’UTR 端双萤光素酶质粒后, SiHa细胞荧光素酶表达降低。结论 miR-1246对人宫