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目的 观察Sirt1对神经母细胞瘤SK N SH细胞系中Tau蛋白磷酸化的影响.方法 在体外培养的SK-N-SH细胞中加入腺病毒过表达的Sirt1和SirtM(Sirt mutant),利用Western blot检测细胞中Sirt1和SirtM的表达,并通过Western blot、Real-time PCR、免疫细胞化学技术检测t-Tau蛋白以及p-Tau蛋白的表达,流式细胞术(FCM)检测Sirt1对SK-N SH细胞凋亡的影响.结果 Western blot结果显示,Sirt1组及SirtM组相比于对照组t-Tau蛋白的水平降低,Sirt1组较SirtM组相比降低较为显著;Tau蛋白的磷酸化位点ser404、thr231更为明显;Real-time PCR结果显示,Sirt1组相比于对照组Tau的mRNA水平下降;免疫细胞化学结果显示,Sirt1可以降低Tau蛋白及其磷酸化的水平;流式细胞术检测提示Sirt1组较对照组降低了SK N-SH细胞的凋亡.结论 Sirt1能够降低神经母细胞瘤SK-N-SH中Tau蛋白的表达及磷酸化、减少细胞的凋亡;本研究为Tau蛋白病等神经退行性疾病的研究提供了重要的实验依据.

作者:陈文楠;杨柳;宫惠琳;张冠军;董炜疆

来源:西安交通大学学报(医学版) 2017 年 38卷 3期

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作者:
陈文楠;杨柳;宫惠琳;张冠军;董炜疆
来源:
西安交通大学学报(医学版) 2017 年 38卷 3期
标签:
组蛋白去乙酰化酶Sirt1 神经母细胞瘤细胞SK-N-SN Tau蛋白磷酸化 Sirt1 neuroblastoma cell line SK-N-SH phosphorylation of Tau
目的 观察Sirt1对神经母细胞瘤SK N SH细胞系中Tau蛋白磷酸化的影响.方法 在体外培养的SK-N-SH细胞中加入腺病毒过表达的Sirt1和SirtM(Sirt mutant),利用Western blot检测细胞中Sirt1和SirtM的表达,并通过Western blot、Real-time PCR、免疫细胞化学技术检测t-Tau蛋白以及p-Tau蛋白的表达,流式细胞术(FCM)检测Sirt1对SK-N SH细胞凋亡的影响.结果 Western blot结果显示,Sirt1组及SirtM组相比于对照组t-Tau蛋白的水平降低,Sirt1组较SirtM组相比降低较为显著;Tau蛋白的磷酸化位点ser404、thr231更为明显;Real-time PCR结果显示,Sirt1组相比于对照组Tau的mRNA水平下降;免疫细胞化学结果显示,Sirt1可以降低Tau蛋白及其磷酸化的水平;流式细胞术检测提示Sirt1组较对照组降低了SK N-SH细胞的凋亡.结论 Sirt1能够降低神经母细胞瘤SK-N-SH中Tau蛋白的表达及磷酸化、减少细胞的凋亡;本研究为Tau蛋白病等神经退行性疾病的研究提供了重要的实验依据.