目的研制一套可识别PTA1分子不同功能性表位的单克隆抗体(mAb)。方法采用亲和层析法从血小板裂解液中纯化的天然PTA1分子免疫Balb/c小鼠，以间接ELISA
筛选阳性杂交瘤，并以PTA1 cDNA转染COS7细胞，进行间接免疫荧光染色和流式细胞术鉴定mAb的特异性。竞争结合试验确定mAb识别PTA1分子的表位。纯化的PTA1
经SDS-PAGE后，转移到PVDF膜，确定mAb是否可用于Western blot。结果共获得7株可稳定分泌mAb的杂交瘤细胞株，分别命名为FMU1，FMU2，FMU3，FMU4，FMU5，
FMU6和FMU7。所有mAb与纯化天然PTA1和PTA1/Ig融合蛋白均有良好的免疫反应性，均可识别PTA1 cDNA转染的COS7细胞。流式细胞仪检测阳性荧光峰型与PTA1阳性
对照Leo Al mAb的荧光峰型相似；7株mAb识别PTA1分子的5个不同表位；FMU1，FMU2，FMU4，FMU5，FMU6和FMU7可应用于Western blot。结论成功地制备7株抗PTA1分子的特异性mAb，这些mAb可分别识别PTA1的5个表位，为PTA1分子结构与功能的研究提供了新的手段。
作者：贾卫；金伯泉；张赟；张继帅；刘雪松；李琦；闵密克
来源：细胞与分子免疫学杂志 2000 年 16卷 6期
