目的通过检测Caspase-3的活性反映Jurkat细胞凋亡。方法用放线菌素D诱导Jurkat细胞8h,裂解细胞,荧光分光光度计测定Caspase-3的活性。同时,用Hoechst法进行检测,并进行平行的方法学比较。结果Jurkat细胞经不同浓度(50μmol/L和100μmol/L)的放线菌素D诱导后,Caspase-3的活性显著增高,倍增值分别为10.091和10.818,相应的Caspase-3活性单位为0.641和0.659;而未经诱导的Jurkat细胞仅为0.061。加入Caspase-3抑制剂后,倍增值分别为0.101和0.119,Caspase-3的活性单位为0.006和0.007。而用Hoechst法染色时,可见Jurkat细胞仅出现早期凋亡的形态学改变。结论荧光定量法是一种良好的定量检测Caspase-3的方法,可用于检测早期的细胞凋亡。
作者:张勇;沈佰华;余奇文;马安伦;李宁丽;张冬青
来源:细胞与分子免疫学杂志 2001 年 17卷 2期