目的: 观察p27KIP1-绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白在肝癌细胞系HCC-9204中的表达及定位. 方法: 根据p27KIP1基因的编码顺序, 应用PCR技术将p27KIP1基因3′末端终止密码TAA突变为TGT, 并通过基因重组技术将其与GFP基因融合.再采用脂质体转染法, 将p27KIP1-GFP融合基因转入HCC-9204细胞中, 用荧光显微镜观察其表达情况. 结果: DNA序列测定的结果显示, p27KIP1 基因与基因库中已收录的p27KIP1 的序列相比较, 仅有1个核苷酸的差异.荧光显微镜显示, 在转染GFP基因的HCC-9204/GFP 细胞中, 荧光均匀地分布于整个细胞; 而在转染融合基因p27KIP1-GFP 的HCC-9204/GFP-p27细胞中, 绿色荧光主要见于核内. 结论: 转染的HCC-9204细胞能高效表达融合基因p27KIP1-GFP, 且定位于细胞核内, 与p27KIP1 基因的表达方式相同.
作者：郑建勇；李江；李开宗；王文亮；王为忠
来源：细胞与分子免疫学杂志 2003 年 19卷 3期
