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目的: 观察HCV C-Fc基因电穿孔法转染的小鼠树突状细胞(DC)功能的改变.方法: 分离小鼠骨髓单个核细胞与rmGM-CSF和rmIL- 4培养1 wk, 对培养的细胞进行形态学观察, 并用FACS检测细胞表面DEC205的表达.以通过质粒pcDNA3HCV C-Fc电穿孔法转染培养的DC, 用间接免疫荧光染色测定转染细胞中HCV C-Fc的水平; 用混合淋巴细胞反应检测电穿孔法转染细胞的功能.结果: 培养1 wk后, 得到具有典型DC形态的细胞, 以质粒pcDNA3HCV C-Fc为载体电穿孔法转染DC后, 转染细胞中可检测到较高水平的HCV C-Fc. 与对照组相比较以电穿孔法转染的细胞能明显刺激混合淋巴细胞反应.结论: 小鼠骨髓单个核细胞加GM-CSF和IL- 4培养1 wk, 可生成大量的DC. 质粒pcDNA3HCV C-Fc转染培养的DC对T细胞刺激作用显著增强.

作者:王全楚;冯志华;周永兴;聂青和;白雪帆

来源:细胞与分子免疫学杂志 2004 年 20卷 3期

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作者:
王全楚;冯志华;周永兴;聂青和;白雪帆
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2004 年 20卷 3期
标签:
小鼠树突状细胞 电转染 混合淋巴细胞反应 HCV C-Fc基因
目的: 观察HCV C-Fc基因电穿孔法转染的小鼠树突状细胞(DC)功能的改变.方法: 分离小鼠骨髓单个核细胞与rmGM-CSF和rmIL- 4培养1 wk, 对培养的细胞进行形态学观察, 并用FACS检测细胞表面DEC205的表达.以通过质粒pcDNA3HCV C-Fc电穿孔法转染培养的DC, 用间接免疫荧光染色测定转染细胞中HCV C-Fc的水平; 用混合淋巴细胞反应检测电穿孔法转染细胞的功能.结果: 培养1 wk后, 得到具有典型DC形态的细胞, 以质粒pcDNA3HCV C-Fc为载体电穿孔法转染DC后, 转染细胞中可检测到较高水平的HCV C-Fc. 与对照组相比较以电穿孔法转染的细胞能明显刺激混合淋巴细胞反应.结论: 小鼠骨髓单个核细胞加GM-CSF和IL- 4培养1 wk, 可生成大量的DC. 质粒pcDNA3HCV C-Fc转染培养的DC对T细胞刺激作用显著增强.