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目的: 从培养的大肠癌细胞Hce-8693中分离纯化并鉴定大肠癌相关抗原.方法: 利用流式细胞术选择高表达大肠癌相关抗原的大肠癌细胞系, 分别用单去污及三去污裂解液裂解细胞.然后用5株抗大肠癌单克隆抗体(mAb)CYL-1~ CYL-5进行Western blot, 分析与大肠癌细胞结合反应最强的mAb.以此mAb作为配基进行亲和层析纯化大肠癌相关抗原, 纯化结果利用Western blot法进行鉴定 .结果: 大肠癌细胞系Hce-8693上相关抗原的表达量最高; 抗大肠癌mAb CYL-2与Hce-8693的结合力最强.纯化所获与CYL-2特异结合的大肠癌相关抗原, Mr约为13×103.该抗原由Mr为60×103和70×103 两种亚基组成.结论: 利用mAb CYL-2进行亲和层析, 从大肠癌细胞系Hce-8693中获得纯化的肿瘤相关抗原.

作者:杨勇;李郁;王贤辉;商澎;汪莉;骞爱荣;姚西英;陈志南

来源:细胞与分子免疫学杂志 2004 年 20卷 3期

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作者:
杨勇;李郁;王贤辉;商澎;汪莉;骞爱荣;姚西英;陈志南
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2004 年 20卷 3期
标签:
大肠癌抗原 亲和色谱法 单克隆抗体
目的: 从培养的大肠癌细胞Hce-8693中分离纯化并鉴定大肠癌相关抗原.方法: 利用流式细胞术选择高表达大肠癌相关抗原的大肠癌细胞系, 分别用单去污及三去污裂解液裂解细胞.然后用5株抗大肠癌单克隆抗体(mAb)CYL-1~ CYL-5进行Western blot, 分析与大肠癌细胞结合反应最强的mAb.以此mAb作为配基进行亲和层析纯化大肠癌相关抗原, 纯化结果利用Western blot法进行鉴定 .结果: 大肠癌细胞系Hce-8693上相关抗原的表达量最高; 抗大肠癌mAb CYL-2与Hce-8693的结合力最强.纯化所获与CYL-2特异结合的大肠癌相关抗原, Mr约为13×103.该抗原由Mr为60×103和70×103 两种亚基组成.结论: 利用mAb CYL-2进行亲和层析, 从大肠癌细胞系Hce-8693中获得纯化的肿瘤相关抗原.